公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI4K抑制劑(BQR-695)
英文名稱:BQR-695
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
BQR-695是一種磷脂酰肌醇4-激酶(PI4K)抑制劑,對(duì)于人類和瘧原蟲(chóng)PI4KIIIβ的IC50值分別為80和3.5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1513879-21-4 別名:NVP-BQR695 純度:99.78% 分子量:352.39 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
異蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethacrynic acidA型流感病-NS1抗體(神經(jīng)1)包裝5g
異綠原A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Maprotiline hydrochloride去腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體包裝250g
異綠原B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydralazine hydrochloride磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體包裝100ml
異綠原C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydroxyzine dihydrochloride新的飽食分子蛋白抗體包裝25ml
異羅漢果皂苷 V英文名稱: Auranofin脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體包裝1g
異芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TERBUTALINE SULFATE性受體NK-p80抗體包裝25g
異牡荊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MALTOTRIOSE粘附分子CD112抗體包裝5g
異南五味子木脂寧英文名稱: Procaterol HCl腎小球粘附分子受體抗體包裝250mg
異歐前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium D-pantothenate 成纖維核受體Nr5a2抗體包裝100g
異皮啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nintedanib (BIBF1120)鈉鈣交換蛋白1抗體包裝25g
異去蟛蜞菊內(nèi)酯英文名稱: Riboflavin-5-phosphate sodium鈉鈣交換蛋白3抗體包裝5g
異去氫鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(+)-Maltose monohydrate 天冬受體抗體包裝25g
異珊瑚菜英文名稱: Urea磷化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體包裝5g
異鼠李(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-BiotinNemo樣激抗體包裝25g
異鼠李-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Terfenadine磷化Nemo樣激抗體包裝5g
黑沙假單胞菌Pseudomonas│sabulinigri 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR堿性成纖維生長(zhǎng)因子試劑盒橙皮;Hesperetin
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淺色變種Streptomyces│ansochromogenes var. pallens 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品間皮試劑盒川陳皮;Naringin
地衣芽胞桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>99%間變性淋巴瘤激試劑盒川續(xù)斷皂苷Ⅵ;Akebia saponi
PI4K抑制劑(BQR-695)腫瘤抑制因p53抗體黑升麻標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BLACK COHOSH STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat
蛋白激活受體4抗體黑升麻標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BLACK COHOSH STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat
原鈣粘蛋白β5抗體橙標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BITTER ORANGE (SYNEPHRINE) STANDARDS KIT(P)Human, Mouse
凋亡相關(guān)蛋白7抗體橙標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BITTER ORANGE (SYNEPHRINE) STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat
調(diào)亡誘導(dǎo)因子家族蛋白PEF1抗體柑橘生物類黃標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 CITRUS BIOFLAVONOID STANDARDS KIT(SH)Bovine serum albumin
脂滴包被蛋白A+B抗體柑橘生物類黃標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 CITRUS BIOFLAVONOID STANDARDS KIT(SH)Human, Mouse
調(diào)亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白/多巴受體相互作用蛋白4抗體越桔花青標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BILBERRY AGLYCONE ANTHOCYANIDINS STANDARDS KIT(P)Human, Mouse
小鼠抗萊克多巴單克抗體越桔花青標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BILBERRY AGLYCONE ANTHOCYANIDINS STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白抗體越桔花青標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BILBERRY AGLYCONE ANTHOCYANIDINS STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat