公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DHFR抑制劑(Proguanil)
英文名稱:Proguanil
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Proguanil是一種抗瘧藥前體藥物,代謝為活性代謝物環(huán)鳥苷。環(huán)鳥苷是一種二氫葉酸還原酶(DHFR)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):500-92-5 純度:99.14% 分子量:253.73 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
雞矢藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Monensin sodium salt富含亮重復(fù)蛋白6抗體包裝1g
雞血藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Monensin sodium salt低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白12抗體(抑制腫瘤蛋白7)包裝25g
雞眼睛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hippuric acid磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝5g
積雪草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Avicularin低密度脂蛋白受體抗體包裝100g
積雪草苷B英文名稱: Pimobendan瘦抗體包裝25g
積雪草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Amino-4'-fluorobenzophenone 腫瘤自身抗原LMO4抗體包裝500g
積雪草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-amino-4'-chlorobenzophenone 淋巴特異性蛋白酪激抗體包裝1g
吉馬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Protostemonine白免疫球蛋白樣受體8抗體包裝25g
吉祥草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bullatine A白三烯B4受體1抗體包裝5g
急性子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ophiopogonin D'白免疫球蛋白樣受體6抗體包裝1g
蒺藜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BendrofluMethiazide淋巴活化基因-3抗體包裝5g
蒺藜皂苷D英文名稱: Plumbagin白相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體包裝1g
蒺藜皂苷K英文名稱: Lapachol 白分化抗原CD207抗體包裝5g
己可可堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Armillarisin A白三烯B4受體2抗體包裝25g
加蘭他敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 17α-Hydroxypregnenolone白相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體包裝5g
干酪乳桿菌干酪亞種Lactobacillus│casei subsp.casei 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白試劑盒非洲防己堿;Columbamine
米根霉Rhizopus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:≥97.0%,BR抗殺菌通透性增高蛋白抗體試劑盒佛司可林;Forskolin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗腮腺管抗體試劑盒伏格列波糖;Voglibose
DHFR抑制劑(Proguanil)早幼粒白血病鋅指蛋白抗體雷美替 Charybdotoxin
骨架蛋白C端PDLIM1抗體雷奈鍶 Corticotropin Releasing Factor,ovine
腫瘤抑制因野生型P53單抗 Crystalline
磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體利伐沙班 Delta-MSH
磷肌磷脂PLCZ1抗體利克飛龍 Endothelin 2 (human, canine)
磷脂磷2b抗體利馬前列 Endothelin 3, human, rat
磷化端粒結(jié)合蛋白P23抗體利莫那班羧 Eosinophilotactic Peptide
磷二酯5A抗體利培 Exendin 4
節(jié)律抑制蛋白PER1抗體利塞膦 Fibrinopeptide B, human