商品介紹:
DAPTA是一種合成肽,為CCR5抑制劑,同時具有抗HIV的活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:106362-34-9 別名:ASTTTNYT;D-Ala-peptide T-amide;Adaptavir 純度:98.73% 分子量:856.88 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CCR5抑制劑(DAPTA) | DAPTA | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
澤瀉C-23-醋酯;澤瀉C單乙酯英文名稱: Vanillin 核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體包裝500g
澤瀉F(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vanillin 線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體包裝25g
粘委陵菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: VITAMIN D4尼曼匹克C2前體蛋白抗體包裝5g
戰(zhàn)骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-FLUOROCINNAMONITRILE煙酰腺嘌呤二核苷1抗體包裝100g
獐牙菜苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydroxylammonium chloride一氧化氮合成-1抗體(神經(jīng)型)包裝25g
獐牙菜苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體包裝500g
樟腦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Pyridinealdoxime methochloride造血蛋白1抗體包裝10mg
掌葉防已堿;巴馬汀,黃藤;(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE骨巢蛋白抗體包裝25g
柘木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amidopyrine/aminopyrineNUP54抗體包裝5g
浙貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thalidomide親核β1抗體包裝1g
鷓鴣菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BENACTYZINE HYDROCHLORIDE谷受體NMDAζ1抗體包裝100ml
珍珠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Antipyrine谷受體NMDAζ2抗體包裝25ml
珍珠母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Antipyrine神經(jīng)元2抗體包裝100g
正丁基酞;丁基酞內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thymol抑癌基因NDRG3抗體包裝25g
正二十九烷英文名稱: Fluorescein disodium salt有絲分裂氧化1抗體包裝1g
: =ATCC33787資源名稱: 溶藻弧菌 質(zhì)量規(guī)格:含量>90%%,BR酰硫試劑盒白頭翁皂苷D;Pulsatilla sa
: =JCM11558=CIP107954=LMG21403資源名稱: 海動物腸希瓦氏菌 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品肟前列腺D2試劑盒半齒澤蘭;Bulk Inquiry
日本鵝膏Amanita│japanica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,效價>900µg/mg,BR,可用于培養(yǎng)基化DNA[蛋白]半胱S基轉(zhuǎn)移ELISA Kit并黃;alpha-Naphthofl
CCR5抑制劑(DAPTA)周期F抗體磷吡哆(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetracaine HCl
泛連接CUL7蛋白抗體磷吡哆丁咯地爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetracaine HCl
狀腺受體相互作用蛋白15抗體磷伯安喹(標(biāo)準(zhǔn)品) Tolazoline HCl
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞6抗體磷川芎(標(biāo)準(zhǔn)品) Tolterodine Tartrate
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞4抗體磷二氫(標(biāo)準(zhǔn)品) Tolterodine Tartrate
心肌肌鈣蛋白抗體磷肌鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Topiramate
CAP1抗體磷咯萘啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Topiramate
粒-巨噬集落激因子3抗體磷喹(標(biāo)準(zhǔn)品) Tozasertib,VX-680/MK-0457
表面趨化因子受體7抗體磷喹(標(biāo)準(zhǔn)品) Trospium chloride