商品介紹:
Flumequine是抗生素,能抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶II,IC50為15μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):42835-25-6 分子量:261.25 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
靈芝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): ECG 酪磷受體相互作用蛋白Liprin α1抗體包裝5g
靈芝內(nèi)酯B英文名稱(chēng): Rebaudioside A線(xiàn)粒體離子肽1抗體包裝1g
靈芝A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Rebaudioside A微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體包裝1g
靈芝 B英文名稱(chēng): Cycloleucine Methyl Ester.HCl假定腫瘤抑制亮拉鏈蛋白1抗體包裝25g
靈芝A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): GLT003乳脫氫LDH-C(腫瘤/抗原32)抗體包裝5g
靈芝C2英文名稱(chēng): Trisbromoneopentyl Alcohol 腫瘤抑制基因LUCA15抗體包裝100g
靈芝D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): GLT001淋巴特異性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體包裝25g
靈芝D2英文名稱(chēng): TricineRNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體包裝500g
靈芝F(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tricine磷化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體包裝1g
靈芝G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): SAR245409 (XL-765)磷化淋巴特異性蛋白酪激抗體包裝5g
靈芝I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): TES Sodium低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體包裝500ug
靈芝LM2英文名稱(chēng): TES磷化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體包裝5g
靈芝二英文名稱(chēng): TAPSO monosodium磷化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體包裝1g
靈芝烯D英文名稱(chēng): TAPSO蘇蛋白激LKB1抗體包裝1g
凌霄花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): TAPS Sodium Salt低分子量蛋白7抗體包裝1g
粘紅酵母Rhodotorula│glutinis 質(zhì)量規(guī)格:BR,80~90%抗磷脂??贵w試劑盒1,7-二羥基-3,4-二氧基山-7
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR抗磷脂酰絲抗體試劑盒二氫歐山芹 ; Columbianet
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗磷脂酰甘油抗體試劑盒二氫辣椒;Dihydrocapsaic
拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑(Flumequine)真核翻譯起始因子2C4抗體鈣衛(wèi)蛋白(CALP)檢測(cè)試劑盒CALP ELISA Kit
Rho GTP激活蛋白15抗體鈣通道阻滯劑(CCB)檢測(cè)試劑盒CCB ELISA Kit
抑癌因結(jié)合蛋白ARID1B抗體鈣調(diào)(CAM)檢測(cè)試劑盒CAM ELISA Kit
E3連接蛋白ARIH2抗體鈣結(jié)合蛋白(CR)檢測(cè)試劑盒CR ELISA Kit
ADP核糖化樣因子1抗體鈣非依賴(lài)型磷脂A2(iPLA2)檢測(cè)試劑盒iPLA2 ELISA Kit
ADP核糖化因子樣蛋白4抗體分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒sIgA ELISA Kit
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3抗體分泌型磷脂A2(sPLA2)檢測(cè)試劑盒sPLA2 ELISA Kit
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型2抗體肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)檢測(cè)試劑盒PARC/CCL18 ELISA Kit
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型4抗體肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)檢測(cè)試劑盒SP-C ELISA Kit