HCVRNA復(fù)制抑制劑(Sofosbuvir impurity A)公司*的產(chǎn)品：Anti-HIF-1 Beta/ARNT1/FITC 熒光素標(biāo)記缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標(biāo)記抗人、

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：HCVRNA復(fù)制抑制劑(Sofosbuvir impurity A)

英文名稱：Sofosbuvir impurity A

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

芝麻林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Methyl-5-nitroimidazoleNADPH oxidase 3抗體包裝5g

芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Dihydralazine sulphateNADPH氧化NOX家族的成員4抗體包裝5g

知母（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Amitriptyline HCl 分裂周期相關(guān)蛋白1抗體包裝1g

知母皂苷A1英文名稱： IPRATROPIUM BROMIDENFAM1抗體包裝5g

知母皂苷A3（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Lysine Acetylsalicylate環(huán)指蛋白67抗體包裝100ml

知母皂苷BII（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Guaifenesin神經(jīng)母瘤抑瘤蛋白1抗體包裝25ml

知母皂苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Cloperastine hydrochloride嗜中性粒胞漿因子1抗體包裝5ml

梔子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Mannitol；D-Mannitol線粒體復(fù)合物NDUFS3蛋白抗體包裝1g

蜘蛛香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Mannitol；D-Mannitol雄激受體復(fù)合物相關(guān)蛋白/核受體相互作用蛋白抗體包裝5g

植(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Elacridar;GF120918;GW09189號(hào)染色體開放閱讀框156抗體包裝1g

止瀉木子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Venlaine hydrochloride核因子活化T胞漿蛋白3抗體包裝25g

枳殼（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Venlaine hydrochloride干轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體包裝5g

枳實(shí)（橙）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Protoporphyrin IX神經(jīng)凋亡抑制蛋白抗體包裝1g

制何首烏（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ropivacaine mesylate樣蛋白2抗體包裝25g

腫節(jié)風(fēng)（草珊瑚）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ropivacaine mesylateSNF1/AMP激相關(guān)激2抗體包裝5g

: =LMG3301=NCTC12171=CIP105838資源名稱: 中間蒼白桿菌 質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定基化CpG結(jié)合蛋白2試劑盒白皮杉;Piceatannol

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade脊髓灰質(zhì)炎病抗原試劑盒白蠟樹精;Fraxinol

: =AS2.368資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品脊髓灰質(zhì)炎病試劑盒白花前胡E;Praeruptorin
HCVRNA復(fù)制抑制劑(Sofosbuvir impurity A)周期M3抗體血紅蛋白(HB)檢測(cè)試劑盒HB ELISA Kit

周期Y/X抗體血管抑(ANG)檢測(cè)試劑盒ANG ELISA Kit

磷化周期D3抗體血管性血友病因子(vWF)檢測(cè)試劑盒vWF ELISA Kit

色b5還原3抗體血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)檢測(cè)試劑盒VCAM1 ELISA Kit

CWC22蛋白抗體血管生成樣蛋白7(ANGPTL7)檢測(cè)試劑盒ANGPTL7 ELISA Kit

9號(hào)染色體開放閱讀框95抗體血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)檢測(cè)試劑盒ANGPTL3 ELISA Kit

19號(hào)染色體開放閱讀框67抗體血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)檢測(cè)試劑盒ANGPTL2 ELISA Kit

磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體血管生成樣蛋白1(ANGPTL1)檢測(cè)試劑盒ANGPTL1 ELISA Kit

原卟啉氧化3抗體血管生成4(ANGPT4)檢測(cè)試劑盒ANGPT4 ELISA Kit 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)