商品介紹:
MCC950是一種有效的選擇性NLRP3抑制劑,作用于BMDMs和HMDMs,IC50分別為7.5nM和8.1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):210826-40-7 別名:CP-456773 純度:96.37% 分子量:404.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
NLRP3抑制劑(MCC950) | MCC950 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商陸皂苷T英文名稱: Dendrobine肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體包裝5g
商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Punicalin雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體包裝1g
商陸皂苷辛英文名稱: (?)-Huperzine A基質(zhì)金屬蛋白20包裝5g
芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cyanidin-3-O-glucoside chloride多藥耐藥相關(guān)蛋白8抗體包裝1g
芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carthamine;Safflower Yellow多藥耐藥相關(guān)蛋白7抗體包裝25g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L(+)-Rhamnose monohydrate磷化卡波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體包裝5g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L(+)-Rhamnose monohydrate酪蛋白激分裂抗體包裝1g
蛇膽汁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carnosol卡波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體包裝5g
射干(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carnosic acid黑色瘤抗原F蛋白家族1抗體包裝25g
麝香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bisdemethoxycurcumin糖蛋白GNTVA抗體包裝5g
伸筋草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DicoumarolIGFBP2結(jié)合蛋白/遷移和侵潤抑制蛋白抗體包裝100g
腎茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Monotropein微管相關(guān)蛋白1B抗體包裝25g
升麻(興安升麻)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Narcissoside錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體包裝25g
升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: OSU-03012(AR-12)神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體包裝5g
升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: SpinosinMYRIP蛋白抗體包裝1g
: F598資源名稱: 曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%抗M2膽堿能受體抗體ELISA Kit丹參IIA磺鈉;Tanshinone
: 18904資源名稱: 百日咳博德特氏菌 質(zhì)量規(guī)格:供TCL鑒別用抗Ku抗體試劑盒丹參Ⅰ;Tanshinone I
黑木耳Auricularia│auricula-judae 質(zhì)量規(guī)格:745~875μg/mg,USP抗IVIgG抗體ELISA Kit地奧司明;Diosmin
NLRP3抑制劑(MCC950)質(zhì)金屬蛋白-9抗原鹽普魯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
質(zhì)金屬蛋白-10抗原鹽普羅帕(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
髓過氧化物抗原鹽齊拉西(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
多藥耐藥相關(guān)蛋白2鹽強(qiáng)力霉/鹽多西環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原鹽羥(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
線粒體核糖體蛋白L28(抗原)鹽羥唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原鹽羥(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
胃粘液抗原鹽曲美他(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
褪黑受體1B抗原鹽曲普利啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human