以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
氨酰tRNA結(jié)合核糖體抑制劑 | Chlortetracycline hydrochloride | 1mL(10mM)|250mg | 1~3天 |
商品介紹:
Chlortetracycline鹽酸鹽是一種特異性的有效鈣離子載體抗生素,抑制氨酰tRNA結(jié)合到核糖體。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:64-72-2 別名:7-Chlorotetracycline hydrochloride 純度:99.45% 分子量:515.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
牡丹皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Saikosaponin B2珠蛋白1抗體包裝100ml
牡丹皮苷C英文名稱: Saikosaponin C肌球蛋白輕鏈9抗體包裝25ml
牡荊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Saikosaponian D磷化肌球蛋白輕鏈9抗體包裝1g
牡荊-4''-O-葡萄糖苷英文名稱: HederageninNADH復(fù)合體1抗體包裝5g
牡荊葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hederagenin癌相關(guān)抗原抗體包裝100g
牡荊鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epimedin A組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移MOF抗體包裝25g
木鱉子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epimedin A1間質(zhì)蛋白抗體包裝10g
木芙蓉葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epimedin B肌球蛋白輕鏈3抗體包裝100g
木瓜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epmedin C多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體包裝25g
木蝴蝶苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aurantio-obtusin同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體包裝5g
木蝴蝶苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hesperidin增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體包裝1g
木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hesperidin肌鈀蛋白抗體包裝5g
木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hesperitin肌管相關(guān)蛋白2抗體包裝25g
木蘭脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cordycepin基質(zhì)金屬蛋白18/19抗體包裝10g
木棉花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nobiletin增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體包裝250g
: =JCM9420=ATCC51300=DSM44048=IFO15854=IMSNU資源名稱: 盧森坦類諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>97%,游離抗膠原蛋白抗體試劑盒扁豆堿;PhysostigMine
康寧木霉Trichoderma│konigii 質(zhì)量規(guī)格:BS生物染色級抗?fàn)钕傥⒘sw抗體試劑盒冬凌草乙;Ponicidin
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:BS抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵w試劑盒多烯紫杉;Docetaxel
氨酰tRNA結(jié)合核糖體抑制劑脂肪合成柴胡皂苷IHuman, Mouse, Rat
絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原蟾靈;蟾酥靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
脂肪去飽和1長春里寧Human, Mouse
γ1丁偶聯(lián)血藍(lán)蛋白長春新(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
γ1丁偶聯(lián)牛血清白蛋白常春藤苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
糖原合激-3 beta(多肽)常春藤苷DHuman, Mouse
熒光標(biāo)記慶大霉常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷Human, Mouse
糖原合激-3α (多肽)常春藤皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
磷化糖原合激-3β (多肽)常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷Human, Mouse, Rat