公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HCVRNA復(fù)制抑制劑(PSI-7977)
英文名稱:Sofosbuvir impurity M
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Sofosbuvir impurity M是sofosbuvir的非對映異構(gòu)體,是sofosbuvir的雜質(zhì)。Sofosbuvir(PSI-7977)是HCVRNA復(fù)制的抑制劑,表現(xiàn)出有效的抗丙型肝炎病毒活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:2095551-10-1 分子量:527.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
端羥基左旋聚乳(重均分子量206-288萬)英文名稱: Omeprazole Sodium Monohydrate神經(jīng)營養(yǎng)因子3抗體包裝5g
端羥基左旋聚乳(重均分子量26-36萬)英文名稱: Dipivefrin hydrochlorideNEEP21蛋白抗體包裝100g
端羥基左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬)英文名稱: Methylophiopogonone A磷化谷受體2B抗體包裝25g
端羥基左旋聚乳(重均分子量36-48萬)英文名稱: Penciclovir磷化谷受體2B抗體包裝100g
端羥基左旋聚乳(重均分子量48-73萬)英文名稱: BenazeprilatNADH氧化還原輔10抗體包裝25g
端羥基左旋聚乳(重均分子量5.5-9萬)英文名稱: Aceclofenac膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體包裝500g
端羥基左旋聚乳(重均分子量73-102萬)英文名稱: TG-101209;TG 101209跨膜受體蛋白Notch-2抗體包裝100g
端羥基左旋聚乳(重均分子量9-17萬)英文名稱: Azasetron Hydrochloride磷化KB抑制蛋白β抗體包裝500g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Propranolol Hydrochloride磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝1g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Metadoxine泛樣蛋白NEDD8抗體包裝100g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: D-Pyroglutamic acid核因子1C型抗體包裝25g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Isorhamnetin 3-sophoroside-7-rhamnoside磷化神經(jīng)正五聚體1抗體包裝5g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: (-)-HolostyligoneRNA結(jié)合蛋白NOB1抗體包裝1g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: 5-Carboxy-X- rhodamine; 5-ROX磷化T激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝5g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Propylthiouracil膽汁受體抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP基質(zhì)金屬蛋白組織抑制因子1試劑盒白樺脂;Betulinicaldehy
鞘單胞菌Sphingomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測定基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4試劑盒;Phenylacetic aci
鹽生鹽古桿菌Halobacterium│halobuim 質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg,BR基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3試劑盒α-菠甾-3-O-β-D-葡萄糖苷;α
HCVRNA復(fù)制抑制劑(PSI-7977)軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體左旋樟腦(標(biāo)準(zhǔn)品) Amfebutamone Hydrochloride
谷受體3A抗體端羥聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量... rosiglitazone hydrochloride
谷受體3B抗體端羥聚乳乙共聚物50/50(重均分子量0.5-... BENZBROMARONE
谷受體3A+3B抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量0.5-1.5萬) Butenafine HCl
P53誘導(dǎo)凋亡抑制蛋白α抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量1.5-3萬) Tropisetron hydrochloride
胞質(zhì)5'核苷1A抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量109-150萬) Tropisetron hydrochloride
NOC2家族樣蛋白抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量150-190萬) Candesartan cilexetil
硝酪抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量16-28萬) Tamsulosin hydrochloride
核蛋白p8抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量190-240萬) N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid