以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Trovirdine抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄,IC50為7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:149488-17-5 別名:LY300046 純度:99.43% 分子量:337.24 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
人參皂苷F5(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Genipin上皮抗原BA46抗體包裝1g
人參皂苷Rb1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aphidicolin from Nigrospora oryzae 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體包裝5g
人參皂苷Rb2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Genipin中腦核仁蛋白抗體包裝1g
人參皂苷Rb3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Platycodin D肌球蛋白重鏈7抗體包裝5g
人參皂苷Rc(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cichoric Acid肌間蛋白1抗體包裝25g
人參皂苷Rd(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pedunculoside肌間蛋白2抗體包裝5g
人參皂苷Rd2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corosolic Acid肌球蛋白輕鏈激3抗體包裝100g
人參皂苷Re(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Theobromine肌球蛋白輕鏈激2抗體包裝25g
人參皂苷Rf(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Matrine絲裂原活化蛋白激3K10抗體包裝5g
人參皂苷Rg1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Matrine絲/蘇蛋白激MST4抗體包裝100g
人參皂苷Rg2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(?)-Quinic acid肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體包裝25g
人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Capsaicin膀胱癌突變蛋白1抗體包裝25g
人參皂苷Rh3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Capsaicin肌肉特定環(huán)指蛋白3抗體包裝5g
人參皂苷Rh7(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Capsaicin腸分化相關(guān)因子1抗體包裝25g
人參皂苷Rh8(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rebaudioside C環(huán)指蛋白62抗體包裝1g
棒形小克銀漢霉Cunninghamella│clavata 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品抗風(fēng)疹病IgM抗體試劑盒膽;Cholic acid
木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%抗風(fēng)疹病IgG抗體試劑盒丁香;3,5-Dimethoxy-4-
小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗肺泡基底膜抗體試劑盒膽紅;Bilirubin
HIV-1逆轉(zhuǎn)錄抑制劑(Trovirdine)植物25羥維生D3羅漢果苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
兔8-異構(gòu)前列腺羅漢果苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激羅漢果黃Human, Mouse
大鼠檸檬合羅漢果皂苷IvaHuman
兔子血小板因子4羅漢果皂苷Ive(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
植物維生C羅漢果皂苷V(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6羅漢果皂苷ⅡA2Human, Mouse
人集落激因子羅漢果皂苷ⅢA1Human
兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白羅漢果皂苷ⅢeHuman