產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p38MAPK抑制劑(SB 203580)
英文名稱:SB 203580
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
SB203580是一種p38MAPK抑制劑,IC50為0.3-0.5μM,也抑制PKB磷酸化,IC50為3-5μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):152121-47-6 別名:RWJ 64809 純度:99.54% 分子量:377.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
氧化白藜蘆-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: ANTHRALIN一氧化氮合成-2抗體(誘導(dǎo)型)包裝5g
氧化槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-Hydroxyphenylacetamide腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體包裝100g
氧化槐果堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prochlorperazine神經(jīng)激肽A抗體包裝25g
氧化苦參堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prochlorperazine磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體包裝5g
氧化前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TGX-221磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體包裝1g
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Acetyl-6-methoxynaphthalene核有絲分裂器NuMA蛋白抗體包裝25g
藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phenprobamate膜相關(guān)蛋白Numb抗體包裝5g
野百合堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Halcinonide谷受體2A抗體包裝1g
野黃芩苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Choline chloride磷化谷受體2B抗體包裝25g
野黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ganoderic acid G 谷受體2B抗體包裝5g
野菊花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pipemidic acid磷化核仁磷蛋白抗體包裝1g
野馬追(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FLUPHENAZINE HYDROCHLORIDE磷化核仁磷蛋白抗體包裝5g
野馬追內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (+)-Brusatol磷化核仁磷蛋白抗體包裝100g
野馬追內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prazosin HCl核因子κB抑制蛋白β抗體包裝25g
野馬追內(nèi)酯K英文名稱: 7-Hydroxycoumarin磷化谷受體2A抗體包裝5g
擬皺褶假絲酵母Candida│pseudorugosa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品角化生長因子試劑盒蟲草;Cordycepin
: ivcas7.01205資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR角化內(nèi)分泌因子試劑盒常春藤皂苷元;Hederagenin
: IFFI3078資源名稱: 少根根霉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品膠轉(zhuǎn)蛋白試劑盒蟾靈;Bufalin
p38MAPK抑制劑(SB 203580)腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體乙香芹酯/2--5-(2-烯)-2-環(huán)己烯-1-乙酯 CARVYLACETATE, (-)-(RG)Human
腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體(-)-香芹 CARVONE, (-)-(AS)Human, Mouse, Rat
磷化血管生成受體2抗體(+)-香芹 CARVONE, (+)-(SG)Human, Mouse, Rat
轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1葛縷 CARVEOL (RG)Human
磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1葛縷 CARVEOL (RG)Human, Mouse
磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1香芹乙酯 CARVACRYL ACETATE(RG)Human, Mouse
磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1香芹乙酯 CARVACRYL ACETATE(RG)Human, Mouse, Rat
磷化血管生成受體2抗體香芹酚 CARVACROL(ISOTHYMOL)(P)Human, Mouse
磷化色羥化抗體香芹酚 CARVACROL(ISOTHYMOL)(P)Human
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)