產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):HCV NS5A抑制劑(Pibrentasvir)
英文名稱(chēng):Pibrentasvir
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Pibrentasvir是一種新型的泛基因型丙型肝炎病毒(HCV)NS5A抑制劑,對(duì)來(lái)自基因型1至6含有NS5A的HCV復(fù)制子的EC50范圍為1.4至5.0pM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1353900-92-1 別名:ABT-530 純度:99.52% 分子量:1113.18 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
華北大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Amfenac Sodium腫瘤抑制基因LPP2抗體包裝5g
華佩蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 8DM腫瘤抑制基因LATS1抗體包裝1g
化橘紅(柚)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Meprednisone磷化單絲蛋白激1/2抗體包裝5g
槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Meprednisone磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體包裝1g
槐耳菌質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Apremilast;CC-10004磷化絲/蘇蛋白激抗體包裝5g
槐果堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-(-)-Glucose磷化絲/蘇蛋白激抗體包裝1g
槐花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 7-Keto-dehydroepiandrosterone磷化絲/蘇蛋白激抗體包裝25g
槐黃英文名稱(chēng): Rubidium nitrate黃體激釋放激類(lèi)似物抗體包裝5g
槐角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): CHIR-99021 (CT99021) HCl磷化核纖層蛋白A/C抗體包裝1g
槐角苷;槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Harmaline;Dihydroharmine磷化淋巴特異性蛋白酪激抗體包裝25g
槐米(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Acadesine膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體包裝5g
獾油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Taraxerol磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體包裝100g
環(huán)黃芪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Prucalopride Succinate磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體包裝25g
環(huán)杷明;環(huán)巴;去氧芥芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Naloxone HCl dihydrate腦瘤相關(guān)基因抗體包裝5g
環(huán)氧澤瀉烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Butoconazole nitrate大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體包裝100g
微桿菌Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR抗髓磷脂抗體IgA試劑盒藁本內(nèi)酯;Ligustilide
草色色串孢Torula│herbarum (Pers.) Link 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品抗蘇?;鵷RNA合成,線粒體試劑盒甘草苷;Liquiritin
: NBRC102493=IAM15022=ATCC35512=CIP106514=DSM2944=JCM21485=KACC12253=BCRC14341=KCTC12140=NCIMB13217資源名稱(chēng): 泛養(yǎng)副球菌 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,SigmaM6383抗蘇?;鵷RNA合成,質(zhì)試劑盒葛根;Puerarin
HCV NS5A抑制劑(Pibrentasvir)載脂蛋白L4抗體高遷移率族蛋白1(HMGB1)檢測(cè)試劑盒HMGB1 ELISA Kit
載脂蛋白L5抗體高敏三碘狀腺原(u-T3)檢測(cè)試劑盒u-T3 ELISA Kit
載脂蛋白M抗體高敏狀腺(u-T4)檢測(cè)試劑盒u-T4 ELISA Kit
載脂蛋白O抗體高密度脂蛋白膽固(HDL-C)檢測(cè)試劑盒HDL-C ELISA Kit
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體高靈敏度促狀腺激(U-TSH)檢測(cè)試劑盒U-TSH ELISA Kit
共濟(jì)失調(diào)性眼球運(yùn)動(dòng)功能喪失相關(guān)蛋白AOA1抗體高爾蛋白73(GP-73)檢測(cè)試劑盒GP-73 ELISA Kit
三號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框抗體高半胱(Hcy)檢測(cè)試劑盒Hcy ELISA Kit
腺嘌呤磷核糖轉(zhuǎn)移抗體干燥綜合征抗原B(SSB)檢測(cè)試劑盒SSB ELISA Kit
磷化水通道蛋白2抗體干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)檢測(cè)試劑盒SCF/MGF ELISA Kit
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)