黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

          | 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

          15202161235

          technology

          首頁   >>   技術(shù)文章   >>   關(guān)于液相色譜的定量分析

          圣賓儀器科技(上海)有限...

          立即詢價

          您提交后,專屬客服將第一時間為您服務(wù)

          關(guān)于液相色譜的定量分析

          閱讀:2670      發(fā)布時間:2017-3-27
          分享:

                   關(guān)于液相色譜的定量分析   

          定量分析是在定性分析的基礎(chǔ)上,需要純物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)樣品。液相色譜的定量是相對的定量方法,即:由已知的標(biāo)準(zhǔn)樣品推算出被測樣品的量。

          液相色譜法定量的依據(jù)被測組分的量(W)與響應(yīng)值(A)(峰高或峰面積)成正比,W=f×A。定量校正因子(f):是定量計算公式的比例常數(shù),其物理意義時單位響應(yīng)值(峰面積)所代表的被測組分的量。由已知標(biāo)準(zhǔn)樣品的量和其響應(yīng)值可以求得定量校正因子。測定未知組分的響應(yīng)值,通過定量校正因子即可求得該組分的量。定量分析常用術(shù)語:樣品(sample):含有帶測物,供色譜分析的溶液。分為標(biāo)樣和未知樣。標(biāo)樣(standard):濃度已知的純品。未知樣(unknow):濃度待測的混合物。樣品量(sample weight):待測樣品的原始稱樣量。稀釋度(dilution):未知樣的稀釋倍數(shù)。組分(componance):欲做定量分析的色譜峰,即含量未知的被測物。組分的量(amount):被測物質(zhì)的含量(或濃度)。積分(integerity):由計算機對色譜峰進行的峰面積測量的計算過程。校正曲線(calibration curve):組分含量對響應(yīng)值的線性曲線,由已知量的標(biāo)準(zhǔn)物建立,用于測定待測物的未知含量。常用的定量方法1外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線法,分為外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。外標(biāo)法在液相色譜中用的zui多。內(nèi)標(biāo)法準(zhǔn)確但是麻煩,在標(biāo)準(zhǔn)方法中用的zui多。用被測化合物的純品作為標(biāo)準(zhǔn)樣品,配制成一系列的已知濃度的標(biāo)樣。注入色譜柱的到其響應(yīng)值(峰面積)。 
          在一定范圍內(nèi),標(biāo)樣的濃度與響應(yīng)值之間存在較好的線性關(guān)系,即W=f×A,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

          在*相同的實驗條件下,注入未知樣品,得到欲測組分的響應(yīng)值。根據(jù)已知的系數(shù)f,即可求出欲測組分的濃度。

           

          外標(biāo)法的優(yōu)點:操作、計算簡單,是一種常用的定量方法; 無需各組分都被檢出、洗脫;需要標(biāo)樣;標(biāo)樣及未知樣品的測定條件要一致;進樣體積要準(zhǔn)確。
          外標(biāo)法缺點:實驗條件要求高,如檢測器的靈敏度,流速、流動相組成的不能發(fā)生變化;每次進樣體積要有好的重復(fù)性。2內(nèi)標(biāo)法

          操作:

          將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品,制成混合標(biāo)樣,并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣?;旌蠘?biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。注入色譜柱,以(標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積)為響應(yīng)值。根據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系,即W=f×A,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

          將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品,注入色譜柱,得到欲測組分的響應(yīng)值。根據(jù)已知的系數(shù)f,即可求出欲測組分的濃度。
          內(nèi)標(biāo)法的特點:操作過程中樣品和內(nèi)標(biāo)是混合在一起注入色譜柱的,因此只要混合溶液中被測組分與內(nèi)標(biāo)的量的比值恒定,上樣體積的變化不會影響影響定量結(jié)果。內(nèi)標(biāo)法抵消了上樣體積,乃至流動相、檢測器的影響,因此比外標(biāo)法。案例分析案例分析一我做的是苯酚羥基化反應(yīng),產(chǎn)物中有苯酚,苯二酚(鄰,對),苯醌,焦油,用安捷倫1100液相色譜分析,外標(biāo)法計算選擇性和轉(zhuǎn)化率。但一直以來,計算出的結(jié)果老是差強人意。偶爾算出一個好的結(jié)果,但是一重復(fù)又不行了,有時候重復(fù)做幾次都不一樣,很是郁悶。zui近又老算出來選擇性超過100%。開始懷疑稀釋誤差的問題(樣品是稀釋以后去測的),但現(xiàn)在操作的時候非常小心了,懷疑標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題,但是重新做了好幾條了。結(jié)果就是很奇怪,自己想了想:1.因為液相色譜儀是公用的,所以特意買了的色譜柱。但經(jīng)常測的時候發(fā)現(xiàn)柱壓不一樣,是不是因為這個影響了峰面積,進而影響了結(jié)果?柱壓的影響這么大么?2.是不是外標(biāo)法就不準(zhǔn)確?該用單點校正法?之前覺得每次測樣前都配一個標(biāo)樣有點麻煩,所以沒用。3.還是別的什么原因?補充:用的柱子是ZORBAX SB-C18, 用的甲醇:水=3:7,每個峰都分的很開。取樣后離心去掉催化劑,再定量稀釋然后去測的。

          網(wǎng)友七嘴八舌:

           

          - 有時候確實柱壓不同會對結(jié)果有影響,但這是柱壓差別很大的情況才會發(fā)生。是不是柱子沒沖洗好,或者需要看是否進氣泡了,因為這都可能導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)。

          - 如果柱壓的差別很大的話,比如30bar已經(jīng)很大了,平時用的時候,有柱溫箱,一般都控制溫度恒定的,基本同意條件不會有這么大的變化,zui多10bar上下浮動,通常小于5bar。

          - 是不是走過緩沖鹽的流動相?用水低流速長時間沖洗,再換乙腈沖洗試試看。是不是有些不物殘留在柱子中沒有及時沖洗導(dǎo)致柱壓偏高,可以嘗試用異丙醇試試。

          - 柱壓變化主要會影響保留時間,對峰面積影響不大。你所說的重復(fù)性不好,是液相進同一個樣品重復(fù)不好還是不同的樣品。如果不同的樣品那是你反應(yīng)的問題。至于選擇性超過100%?是否是計算方法錯誤?

          - 簡單來說,計算苯二酚的選擇性:

          假設(shè)對苯峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線得濃度C1(g/ml);鄰苯峰面積對應(yīng)濃度C2,苯酚峰面積對應(yīng)濃度C,溶液總體積V,稀釋倍數(shù)20,初始苯酚加入量m(g),如下

           

          - 計算公式如果沒錯,可以看看是否自己沒有做過空白以及反應(yīng)投料時的組分測試。

          - 至于單點還是外標(biāo)法?

          單點校正比較簡單,如果要求不是很嚴(yán)格的話,單點校正可以滿足要求。單點標(biāo)準(zhǔn)濃度如果在被測樣品濃度附近,結(jié)果比外標(biāo)法更準(zhǔn)確。做考核樣時,我們一般先用外標(biāo)法定出大致濃度范圍,再以單點法定量。

          單點一般適用于線性曲線截距在100%濃度點2%以下的。高于20%不能采用單點校正和外標(biāo)。外標(biāo)法對照和拱式樣品濃度應(yīng)一致,校正曲線線性符合即可。

          案例分析二我想用液相色譜進行定量分析,使用外標(biāo)法。問題是:標(biāo)準(zhǔn)曲線是不是每次測定樣品時都要做一次?我有200個樣品,但不是一次能做好,每次我可以測20個樣品。難道我每次測定前都要先做一下標(biāo)準(zhǔn)曲線?我是同一臺儀器,同一條件。網(wǎng)友七嘴八舌:

          從嚴(yán)格意義上來講應(yīng)該是每天做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果你做的東西要求不是太嚴(yán)格(不需要報批),可以考慮隔幾天做一天標(biāo)曲。不可否認(rèn)的是,每天都做標(biāo)準(zhǔn)曲線能減小測量的數(shù)據(jù)的誤差。

          但是如果是藥品檢測,是應(yīng)該每次開機測定樣品前做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線或單點校正標(biāo)準(zhǔn)溶液分析,但普通化工分析要求不嚴(yán)就沒有必要每次做曲線,因為差異不大的。但如果是檢測單位檢測樣品,就要根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)來執(zhí)行了。說白了其實是規(guī)范不規(guī)范的問題。

          會員登錄

          請輸入賬號

          請輸入密碼

          =

          請輸驗證碼

          收藏該商鋪

          標(biāo)簽:
          保存成功

          (空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

          常用:

          提示

          您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
          在線留言
          抚州市| 佳木斯市| 固原市| 通许县| 临潭县| 汾阳市| 平乐县| 独山县| 安新县| 宜阳县| 如皋市| 永宁县| 寿光市| 利津县| 江口县| 茶陵县| 富宁县| 当涂县| 元谋县| 育儿| 措勤县| 本溪| 太原市| 噶尔县| 建平县| 凤山县| 嘉荫县| 琼中| 天全县| 土默特右旗| 乐安县| 乐清市| 日照市| 汨罗市| 日照市| 秦皇岛市| 涿州市| 文安县| 武清区| 新晃| 静乐县|