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| 純度 | 99% | 供貨周期 | 一周 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1*10^6 | 貨號 | bv2 |
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 | 主要用途 | 科研用途 |
Bv2小鼠小膠質細胞/STR鑒定
細胞介紹
該細胞來源于德國DSMZ（German collection of microorganisms and cell cultures），源于C57BL/6小鼠小膠質細胞，表達核v-myc、染色體v-raf癌基因，表面表達envgp70抗原，在形態(tài)學、表型及功能上有吞噬細胞的特征。
細胞特性
1） 來源：小鼠腦
2） 形態(tài)：上皮細胞樣 松散貼壁，懸浮和貼壁細胞混合生長
3） 含量：>1x10^6 細胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）半貼細胞和貼壁不牢（懸浮）細胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完quan培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代，傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完quan培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
Bv2小鼠小膠質細胞/STR鑒定
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM 基礎培養(yǎng)基 (推薦：iCell-0001) 87%
優(yōu)質胎牛血清 10%
GlutaMAX-1谷an酰胺 (推薦：iCell-0900 ) 1%
HEPES 1M Buffer solution (推薦：iCell-01200) 1%
P/S青mei素-鏈mei素 1%.
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細胞處理：
1）凍存細胞的復蘇：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完quan培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完quan培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完quan培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，傳代可以參考以下方法：
1. 收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。
2. 加入0.25％（w / v）yi蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完quan培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
下面T25瓶為例；
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹：
1、原代細胞服務：
?。?）各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
?。?）多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
?。?）原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
?。?）原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
2、細胞系服務：
?。?）細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
?。?）細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
（3）細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
3、iPS細胞服務：
?。?）iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
?。?）iPS細胞增殖及冷凍保存
?。?）iPS基礎培養(yǎng)技術實習
（5）新藥及實驗儀器上市前評估
4、其他技術外包服務、客戶定制服務等
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