EHEB慢性B細胞白血病

細胞接收后的操作流程與注意事項：

1、如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯系實驗室技術人員會跟進解決
2、貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度（最高不能超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3、生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）
2、鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让福?-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3、細胞取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的*培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1、收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清，（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）
2、貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)
3、如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室CRL-5870    NCI-H1435 Cells    ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經驗，能提供細胞培養(yǎng)*的技術支持，讓您實驗再無煩擾！

 EHEB慢性B細胞白血病

注：（1），觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡）下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。

(2)，瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用，請換用加雙抗或無雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后，培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

(3)，有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現貼壁細胞脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。  2、細胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

其它系列產品:VI (CA6) 
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SEH319Hu    人脯氨酸/精氨酸豐富端亮氨酸豐富重復蛋白(PRELP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein (PRELP) 
SEJ103Hu    人絲聚蛋白(FLG)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Filaggrin (FLG) 
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SEL329Hu    人補體因子H相關蛋白3(CFHR3)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Complement Factor H Related Protein 3 (CFHR3) 
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SEJ348Hu    人剪切多聚腺苷酸化特異性因子1(CPSF1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cleavage And Polyadenylation Specific Factor 1 (CPSF1) 
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SEF879Hu    人分泌型卷曲相關蛋白2(SFRP2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 2 (SFRP2) 
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