詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:黃桿菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Flavobacterium spp.PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix(2mM)4 μl
引物1(10pM)2 μl
引物2(10pM)2 μl Taq
酶 (2U/μl)1 μl DNA
模板(50ng-1μg/μl)1 μl
加ddH2O至 50 μl
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl引物2(10PM) 2μlTaq 酶(2U/μl) 1μl DNA 模板(50ng-1μg/μl)???1 μl加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
Phospho-Smad2(Thr220): 0酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 0.1ml
Phospho-Ezrin (Thr567): 0酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml
細(xì)胞粘合素抗體 Anti-Tenascin/TN 0.1ml
Anti-TLR1/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-LEO1(Ser551) 0酸化RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 規(guī)格 0.1ml
Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)ELISA試劑盒 ,英文名: Smad1 ELISA Kit
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA檢測試劑盒MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit 96T/48T
人環(huán)0酸鳥苷(cGMP)免疫試劑盒 Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
ratCoicosterone,COELISAKit大鼠皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2%戊二固著液(Glaraldehyde)50毫升
MouseCTX-2ELISA試劑盒小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃桿菌通用PCR檢測試劑盒phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 0酸化細(xì)胞核因子/0酸化k基因結(jié)合核因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-APOD 載脂蛋白D抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 0酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美國Jackson公司分裝
VEGF-A 英文名稱: 血管內(nèi)皮生長因子A 0.1ml
DNA polymerase delta 英文名稱: DNA聚合酶γ抗體 0.2ml
Anti-APOD 載脂蛋白D抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。