使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1.標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3.在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4.換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5.換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7.用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8.如果有 N 個樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9.如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.

血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3.細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

定量PCR方法：

相關(guān)產(chǎn)品：
伊蒙微小菌探針法熒光定量PCR試劑盒

溶組織內(nèi)阿米巴探針法熒光定量PCR試劑盒

內(nèi)阿米巴通用探針法熒光定量PCR試劑盒

腸道腺病毒41型探針法熒光定量PCR試劑盒
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度

phospho-Alpha synuclein(Ser129)

： 0酸化核突觸蛋白α抗體 0.1ml

Phospho-EphA2 (Tyr594)： 0酸化酪酸蛋白A2受體抗體 0.1ml

Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體 Anti-TDP-43/TARDBP 0.1ml

Anti-TIF1 gamma/Trim33/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-LKB1 (Thr363) 0酸化絲/蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

NT-4,NT-5 神經(jīng)生長因子4/5(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
小鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒 ，英文名： Ang1-7 ELISA Kit

小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA檢測試劑盒MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAkit 96T/48T

人活化蛋白C(APC)免疫試劑盒 Human activated protein C,APC ELISA Kit

RatCompleme3,C3ELISAKit大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

15%聚烯酰胺尿素(7M)凝膠500毫升

MousecrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISA試劑盒小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
腺熱埃里希體PCR檢測試劑盒MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受體1B抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Annexin V 膜粘連蛋白5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Bcl-2 (Thr56) 0酸化Bcl-2抗體 規(guī)格 0.1ml

品名 規(guī)格 備注

VGLUT2 英文名稱： 囊泡谷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 0.2ml

Duck plague virus 英文名稱： 鴨瘟病毒DPV抗體 0.2ml

Anti-Annexin V 膜粘連蛋白5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml