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產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱：多里病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱：Dhori VirusRTPCR
規(guī)格：50T
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1.
血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.
血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1
：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix
（2mM）
4 μl
引物1（10pM）
2 μl
引物2（10pM）
2 μl Taq
酶 （2U/μl）
1 μl DNA
模板（50ng-1μg/μl）
1 μl
加ddH2O至 50 μl
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2 ．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允?span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）3 ．10×PCR Buffer4 ．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM5 ．Taq酶 | 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl Taq 酶（2U/μl） 1μlDNA 模板（50ng-1μg/μl）???1 μl |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3
．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4
．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.5ml
FSH beta： 促卵泡刺激素抗體 0.1ml
乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體 Anti-ChAT 0.1ml
Anti-ORX-A/FITC 熒光素標(biāo)記增食欲素-A/欲激素AIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PKA/PKAcat/PKACB 蛋白A抗體 規(guī)格 0.1ml
IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗豚鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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Anti-AD7C-NTP 神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDH2 (Tyr820) 0酸化N-鈣粘附分子抗體 規(guī)格 0.1ml
免疫組化染色孵育盒(小) 個 可容納6張切片
WNT2 英文名稱： 信號通路Wnt2抗體 0.2ml
DZIP3 英文名稱： RNA結(jié)合泛素連接酶DZIP3抗體 0.2ml
Anti-AD7C-NTP 神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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