詳細(xì)介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:卡氏枝孢霉PCR檢測試劑盒
英文名稱:Cladosporium carrioniiPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)核酸檢測試劑盒
病毒H5亞型(AIV-H5)核酸檢測試劑盒
病毒H7亞型(AIV-H7)核酸檢測試劑盒
高致病性H7亞型病毒核酸檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
FXYD7: FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子7抗體 0.2ml
脫羧酶蛋白體36抗體 Anti-CXorf36 0.2ml
Anti-PACAP/VIP receptor-I /FITC 熒光素標(biāo)記腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-I/血管活性腸肽-I抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-VEGF receptor 2(Tyr1214) 0酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-IgG/Biotin 化兔抗豬IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
小鼠胰島素受體底物2(IRS2)ELISA試劑盒 ,英文名: IRS2 ELISA Kit
兔子白三烯B4(LTB4)ELISA檢測試劑盒rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 96T/48T
犬促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)免疫試劑盒 Canine adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit
英文名稱HumanDHEA-S-7ELISAKit人脫氫表雄同-S-7(DHEA-S-7)規(guī)格:96T/48T
大量植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒5次(20克/次)
Ratkeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
卡氏枝孢霉PCR檢測試劑盒phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 0酸化粘著斑抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 Anti-Bim 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ECT2 (Thr790) 0酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
暗室燈 個
ZNF148 英文名稱: 鋅指蛋白148抗體 0.2ml
DAPL1 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml
細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 Anti-Bim 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。