詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產品屬性:
產品名稱:單胞菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Pseudomonas spp.PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
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實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 |
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
sVEGFR2: 可溶性血管內皮生長因子受體2抗體 0.1ml
FGF19: 成纖維細胞生長因子19抗體 0.2ml
L-組脫羧酶抗體 hu, mo, rat, bov, dog, pig, chi Anti-L-HDC 0.1ml
Anti-RASSF1A/FITC 熒光素標記Ras相關區(qū)域家族1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PLC beta3 (Ser537) 0酸化0酯酶Cβ3抗體 規(guī)格 0.1ml
APP695-770/APP17肽 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(17肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒 ,英文名: M30 ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA檢測試劑盒MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 96T/48T
人肺炎衣原體抗體IgM(Cpn-IgM)免疫試劑盒 Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-IgM ELISA Kit
RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2次
Mousemyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
單胞菌通用PCR檢測試劑盒Humen IFN- Beta 人β-干擾素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NTN3/Netrin-3 軸突生長誘導因子3抗體 規(guī)格 0.2ml
rTaq DNA Polymerase 重組Taq DNA 聚合酶 5000 ul
TIGAR 英文名稱: TIGAR蛋白抗體 0.1ml
phospho-Caspase 6 (Ser257) 英文名稱: 0酸化半胱胺酸蛋白6抗體 0.1ml
Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。