詳細(xì)介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:巨睪前殖吸蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Prosthogonimus macrorchisPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
沙門氏菌通用PCR檢測試劑盒
圣米吉爾海獅病毒PCR檢測試劑盒
白蛉熱西西里病毒PCR檢測試劑盒
札如病毒型PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
Streptokinase: 鏈抗體 0.1ml
eIF3K: 真核翻譯起始因子3K抗體 0.2ml
激素受體相關(guān)蛋白16抗體 Anti-TRA16 0.2ml
Anti-TRA16/FITC 熒光素標(biāo)記激素受體相關(guān)蛋白16抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB4(Tyr1526) 0酸化整合素β4抗體 規(guī)格 0.1ml
PR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)ELISA試劑盒 ,英文名: GRP78 ELISA Kit
小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒MouseEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 96T/48T
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)免疫試劑盒 Human SFRP5 ELISA Kit
Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CDK6蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次
MouseMethylaseELISA試劑盒小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
巨睪前殖吸蟲PCR檢測試劑盒sCD 40L Human 人可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-C-Met/Met/HGFR 肝細(xì)胞生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NPTX1 神經(jīng)細(xì)胞正五聚體1抗體 規(guī)格 0.1ml
PGE2 ELISA Kit(mouse) 小鼠前列腺素E2 96T
TKTL1 英文名稱: 酮基移換酶樣蛋白1抗體 0.2ml
C6orf70 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框70抗體 0.2ml
Anti-C-Met/Met/HGFR 肝細(xì)胞生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。