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          猿分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒

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          更新時(shí)間:2023-03-17 14:04:38瀏覽次數(shù):271

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研實(shí)驗(yàn)
          英文名稱 Mycobacterium simiaePCR 儲(chǔ)存條件 -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融
          分類 PCR檢測(cè)試劑盒    
          猿分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:鏈狀帶絳蟲PCR檢測(cè)試劑盒
          鏈狀帶絳蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
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          亮熱厲螨(小蜂螨?。┨结樂晒舛縋CR試劑盒

          詳細(xì)介紹

          特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          規(guī)格

          猿分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒

          Mycobacterium simiaePCR

          50T

          儲(chǔ)存條件:
          僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
          1.
          血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
          2.
          血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
          3.
          細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
          4.
          組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
          5.
          保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20
          ,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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          定量PCR方法:

          熒光定量PCR探針法

          熒光定量PCR SYBR Green染料法

          快速PCR

          多重 PCR

          探針法即除了引物外另外設(shè)置一個(gè)探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),這個(gè)時(shí)候,兩個(gè)平衡不發(fā)光,但是當(dāng)DNA通過引物合成的時(shí)候,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),兩個(gè)距離較遠(yuǎn),發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,被機(jī)器收集到信號(hào),從而檢測(cè)基因的量

          染料能夠與雙鏈結(jié)合,當(dāng)PCR擴(kuò)增的時(shí)候,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,單個(gè)的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號(hào),我們可以看出,染料法特異性不強(qiáng),只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。

          在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時(shí)間來完成更快的擴(kuò)增,且不會(huì)影響擴(kuò)增產(chǎn)量和效率??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴(kuò)增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個(gè)結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時(shí)間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時(shí)間的1/21/3,卻能維持較高的擴(kuò)增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進(jìn)一步縮短PCR時(shí)間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。

          多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定,是在同一PCR反應(yīng)管中同時(shí)加上多種病原微生物的特異性引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時(shí)檢測(cè)多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。


          相關(guān)產(chǎn)品:
          衣原體通用PCR檢測(cè)試劑盒

          流產(chǎn)嗜衣原體PCR檢測(cè)試劑盒

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          PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
          取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
          兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
          RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
          RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
          RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
          溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度
          SLC6A19
          : 依賴鈣交換蛋白6抗體 0.1ml

          eIF3F: 真核翻譯起始因子3F抗體 0.1ml

          血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3 Anti-VEGFR-3 0.1ml

          Anti-TSARG6/FITC 熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh phospho-IKKi/IKKe(Ser172) 0酸化核因子NFκB抑制蛋白i抗體 規(guī)格 0.1ml

          TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor Beta2) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
          小鼠酸脫氫酶β(PDHβ)ELISA試劑盒 ,英文名: PDHβ ELISA Kit

          人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanadvancedoxidationproteinproducts,AOPPELISAKit 96T/48T

          大鼠可溶性糖蛋白VI(sGPVI)免疫試劑盒 Rat Soluble Glycoprotein VI,SGPVI ELISA KIT

          英文名稱RatproteinkinaseBELISAKit大鼠蛋白B(PKB)規(guī)格:96T/48T

          經(jīng)典水相封片液10毫升

          ELISAKitGTE-AGE人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格:48T/96T
          猿分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒PGF2 Alpha ELISA Kit 大鼠前列腺素F2αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti-TGF Beta R3 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh GNAO1/G0 Protein alpha G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體 規(guī)格 0.2ml

          AECA ELISA Kit 大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體 96T

          TrkB 英文名稱: 酪酸B抗體 0.1ml

          ATXN7L3B 英文名稱: 共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體 0.2ml

          Anti-TGF Beta R3 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          使用方法
          一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
          1.
          標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,54,3,2。
          2.
          用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
          3.
          7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
          4.
          換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
          5.
          換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
          6.
          重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
          二、樣品 DNA 的制備
          7.
          用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
          8.
          如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
          三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
          9.
          如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。


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