詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:龜分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Mycobacterium cheloeiPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
牛仰口線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
羊仰口線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
布尼亞維拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
SLC27A4: 長(zhǎng)鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體 0.1ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537): 0酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
抗體 Anti-Somatostatin/GRIH 0.2ml
Anti-TGF- Beta2 /FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAPK14(Tyr323) 0酸化p38MAPK抗體 規(guī)格 0.1ml
AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor) 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(MPO-ANCA)ELISA試劑盒 ,英文名: MPO-ANCA ELISA Kit
小鼠B因子(BF)ELISA檢測(cè)試劑盒MousefactorB,BFELISAKit 96T/48T
人谷脫羧酶65(GAD65)免疫試劑盒 Human glamic acid decarboxylase 65,GAD65 ELISA Kit
Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISAKit大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
AP反應(yīng)終止緩沖液100毫升
MousehepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISA試劑盒小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
龜分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒VASH1(Vasohibin 1) 兔抗血管抑制蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-procaspase 3 半胱天冬酶-3酶原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCNA [Proliferation Marker] 增殖細(xì)胞核抗原抗體 規(guī)格 0.1ml
GRN Kit Human 人 Granulin / GRN / Progranulin ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TRPM1 英文名稱: 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白1抗體(M亞家族) 0.1ml
Cdc6 英文名稱: 細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 0.1ml
Anti-procaspase 3 半胱天冬酶-3酶原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。