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          亞洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒

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          • 亞洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-03-17 13:37:47瀏覽次數(shù):218

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          應用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研實驗
          英文名稱 Mycobacterium asiaticumPCR 儲存條件 -20℃避光保存,避免反復凍融
          分類 PCR檢測試劑盒    
          亞洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:庫蚊通用探針法熒光定量PCR試劑盒
          快速測序試劑盒
          狂犬病病毒通用PCR檢測試劑盒
          狂犬病毒(RV)核酸檢測試劑盒

          詳細介紹

          特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          規(guī)格

          亞洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒

          Mycobacterium asiaticumPCR

          50T

          儲存條件:
          僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
          1.
          血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
          2.
          血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
          3.
          細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
          4.
          組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
          5.
          保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20
          ,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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          定量PCR方法:

          熒光定量PCR探針法

          熒光定量PCR SYBR Green染料法

          快速PCR

          多重 PCR

          探針法即除了引物外另外設置一個探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團和淬滅集團,這個時候,兩個平衡不發(fā)光,但是當DNA通過引物合成的時候,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團和淬滅集團,兩個距離較遠,發(fā)光集團產(chǎn)生熒光,被機器收集到信號,從而檢測基因的量

          染料能夠與雙鏈結(jié)合,當PCR擴增的時候,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,單個的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號,我們可以看出,染料法特異性不強,只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。

          在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,且不會影響擴增產(chǎn)量和效率??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/21/3,卻能維持較高的擴增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。

          多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。


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          PCR實驗步驟:
          取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
          兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
          RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
          RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>47000rpm離心5分鐘。
          RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
          溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度
          SLC25A11
          : 線粒體二羧酸載體蛋白11抗體 0.2ml

          EP3: 前列腺素E受體3抗體 0.1ml

          肝癌高表達基因抗體 Anti-PEG10 1ml

          Anti-SSTR3/FITC 熒光素標記受體3(SSTR3)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-MYPT1/MBS(Ser507) 0酸化肌球蛋酸酶抗體 規(guī)格 0.1ml

          MMP-2 基質(zhì)金屬-2(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
          小鼠髓樣分化因子88(MyD88)ELISA試劑盒 ,英文名: MyD88 ELISA Kit

          小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA檢測試劑盒MouseNervegrowthfactor,NGFELISAkit 96T/48T

          人轉(zhuǎn)移酶2抗體(IgA)免疫試劑盒 Human ansglaminase 2 aibody IgA ELISA kit

          Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          AP-NPP底物顯色試劑盒10

          Mousehepaticlipase,HLELISA試劑盒小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
          亞洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-Phospho-cdc25A (Thr506) 0酸化細胞分裂周期蛋白25抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh OSGIN1 氧化應激誘導生長抑制因子1抗體 規(guī)格 0.2ml

          CD200R1L Kit Human CD200RLa / CD200R1L ELISA配對抗體 ELISA

          TRPM8 英文名稱: “冷"蛋白TRPM8抗體 0.2ml

          CHCHD2 英文名稱: 丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體 0.2ml

          Anti-Phospho-cdc25A (Thr506) 0酸化細胞分裂周期蛋白25抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
          使用方法
          一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
          1.
          標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2
          2.
          用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
          3.
          7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
          4.
          換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
          5.
          換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
          6.
          重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
          二、樣品 DNA 的制備
          7.
          用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
          8.
          如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
          三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
          9.
          如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。


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