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詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng)：李斯特菌通用PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：Listeria spp.PCR
規(guī)格：50T
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品：
中華絨螯蟹呼腸孤病毒RNA核酸檢測(cè)試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/span>
對(duì)蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
SET： SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
EphA2： 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪酸抗體 0.1ml
核糖核蛋白抗原SSA抗體 Anti-SSA/RO 0.1ml
Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化血管生成素受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290) 0酸化原活化蛋白8抗體 規(guī)格 0.1ml
Kir6.2 peptide ATP敏感性通道亞基kir6.2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
小鼠銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒 ，英文名： CP ELISA Kit
兔子促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitleoopichormone,LHELISAKit 96T/48T
牛羥脯(Hyp)免疫試劑盒 Bovine hydroxyproline,Hyp ELISA Kit
英文名稱(chēng)HumanMMP-4ELISAKit人基質(zhì)金屬4(MMP-4)規(guī)格：96T/48T
動(dòng)物脾臟組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10次
ratProstaglandinE1,PG-E1ELISA試劑盒大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
李斯特菌通用PCR檢測(cè)試劑盒Penicillin G/BSA G偶聯(lián)血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 2mg
Anti-CEAcam8/CD67 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Oct-3/Oct-4 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
WB primary antibody Diluent WB一抗稀釋液 30ml
TUBB5 英文名稱(chēng)： 微管蛋白β5抗體 0.2ml
C1 Inactivator 英文名稱(chēng)： 酯酶抑制蛋白C1IN抗體 0.2ml
Anti-CEAcam8/CD67 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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