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          杜氏利什曼蟲(chóng)黑熱病病原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-17 11:47:07瀏覽次數(shù):276

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研實(shí)驗(yàn)
          英文名稱(chēng) Leishmania donovani()PCR 儲(chǔ)存條件 -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融
          分類(lèi) PCR檢測(cè)試劑盒    
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          產(chǎn)品屬性:
          產(chǎn)品名稱(chēng):杜氏利什曼蟲(chóng)黑熱病病原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
          英文名稱(chēng):Leishmania donovani()PCR
          規(guī)格:50T
          分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
          儲(chǔ)存條件:-20
          避光保存,避免反復(fù)凍融。
          運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

          詳1.png

          儲(chǔ)存條件:
          僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
          1.
          血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
          2.
          血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
          3.
          細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
          4.
          組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
          5.
          保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20
          ,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
          方法
          1
          :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer
          5 μl     dNTP mix
          2mM
          4 μl    
          引物110pM
          2 μl    
          引物210pM
          2 μl     Taq
          酶 (2U/μl
          1 μl     DNA
          模板(50ng-1μg/μl
          1 μl      
          ddH2O 50 μl
          實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

          一、試劑準(zhǔn)備

          二、操作步驟

          1. DNA模板
            2
          .對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允?span>DNA
          也可以是RNA,一般20bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
            3
          10×PCR Buffer
            4
          2mM dNTPmix:含dATPdCTP、dGTPdTTP2mM
            5
          Taq

          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
            10×PCR buffer             5μl
            dNTP mixl                 4μl
           
          引物110pM               2μl
           
          引物210PM              2μl
            Taq
          酶(2U/μl              1μl
                  DNA
          模板(50ng-1μg/μl
          ???1   μl
           
          ddH2O                 50 μl
           
          PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
           
           

          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72 保溫7min。
          3
          .結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4
          待電泳檢測(cè)或-20保存。
          4
          PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

          注意事項(xiàng):
          加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
          使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
          按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
          底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
          洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
          使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
          實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
          試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
          不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

          SERINC3: 絲酸合并蛋白3抗體(差異表達(dá)蛋白) 0.2ml

          Echidnotoxin: 蝮蛇蛇毒蛋白抗體 0.2ml

          受體1抗體 Anti-SSTR1 0.2ml

          Anti-RALDH2/FITC 熒光素標(biāo)記醛脫氫酶2型抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh phospho-MAP3K7IP1(Thr431) 0酸化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

          Aurora B 極光B抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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          Anti-ICAM-2/CD102 細(xì)胞間粘附分子-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh P311 protein 神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

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          CADM2 英文名稱(chēng): 細(xì)胞粘附分子2抗體 0.1ml

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