化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱：牛肺炎支原體PCR檢測試劑盒
規(guī)格：50T
分類：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品：
匙形古柏線蟲PCR檢測試劑盒 Cooperia punctataPCR.偶發(fā)分枝桿菌PCR檢測試劑盒 Mycobacterium fortuitumPCR.旋毛蟲通用PCR檢測試劑盒 Trichinella spp.PCR
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 ，英文名： Dyn ELISA Kit
人金葡菌腸毒素(SE)ELISA檢測試劑盒Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SEELISAKit 96T/48T
大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit
英文名稱HumanP53ELISAKit人P53(P53)規(guī)格：96T/48T
動(dòng)物組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10次
VTGELISA試劑盒鯉魚卵黃蛋白原規(guī)格：96T/48T
Anti-H1N1-A/HRP(Influenza A virus)California 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗季節(jié)性A型人流感病毒H1N1抗體IgG(美國加州型)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉諾坦IIMulti-class antibodies規(guī)格： 1g
CD14/內(nèi)毒素受體抗體 Anti-CD14 0.1ml
SYVN1 英文名稱： 滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體 0.1ml
EphA7 英文名稱： 酪酸蛋白受體A7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-HDAC1(Ser423+Ser421) 0酸化組蛋白去乙酰化酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
MT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉諾坦IIMulti-class antibodies規(guī)格： 1g
牛肺炎支原體PCR檢測試劑盒大鼠肌原纖蛋白1(FBN1)ELISA試劑盒 ，英文名： FBN1 ELISA Kit
Mouse histone deacetylase (HD) ELISA Kit 小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒
RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFXELISAKit大鼠Ⅹ規(guī)格：48T/96T
細(xì)胞精(arginine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍
化工儀器網(wǎng)