詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:霍亂弧菌型PCR檢測試劑盒
英文名稱:Vibrio choleraeO1PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
溶血隱秘桿菌PCR檢測試劑盒 Arcanobacterium haemolyticumPCR.禽阿爾法皰疹病毒型=馬立克病病毒PCR檢測試劑盒 Gallid Alphaherpesvirus 2 (GaHV2)2(=)PCR.豬薩佩羅病毒PCR檢測試劑盒 Porcine Sapelovirus(PSV)RTPCR
實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 ,英文名: sTM ELISA Kit
大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA檢測試劑盒Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 96T/48T
人登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)免疫試劑盒 Human dengue fever aibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kit
RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
FLUORIDE血液抗凝液100毫升
MousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISA試劑盒小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-phosphor-PAK1+PAK2+PAK3 (pSer141)/FITC 熒光素標記抗0酸化p21激活1/2/3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Gold 金標記兔抗豬IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
FosB抗體 Anti-FOSB 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗兔IgG 0.1ml
FNDC3A 英文名稱: Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3A抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-STAT5a(Ser780) 0酸化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG/Gold 金標記兔抗豬IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
霍亂弧菌型PCR檢測試劑盒Collagen VI 大鼠VI型膠原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DMT1 金屬離子轉(zhuǎn)運體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NCX2/SLC8A2 鈣交換蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
Human major histocompatibility complex III ,MHC III /HLA- III ELISA Kit 人主要組織相容性復合體Ⅲ類 96T
SRG11/Spata17 英文名稱: 凋亡基因抗體 0.1ml
CREB-1 英文名稱: 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
Anti-DMT1 金屬離子轉(zhuǎn)運體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。