詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:莫氏立克次氏體PCR檢測試劑盒
英文名稱:Rickettsia mooseriPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
病毒性出血性敗血癥病毒PCR檢測試劑盒
病毒性神經(jīng)壞死病病毒PCR檢測試劑盒
田鼠痘病毒PCR檢測試劑盒
爾斯布朗病毒PCR檢測試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
Z DNA binding protein: Z DNA結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
DULLARD: DULLARD蛋白抗體 0.2ml
銜接蛋白γ抗體 Anti-γ-Adaptin 0.1ml
Anti-Gentamicin/Gold 膠體金離子標(biāo)記兔抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml(35nm-40nm)
Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser105) 0酸化雌激素受體β抗體 規(guī)格 0.1ml
DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠Ⅱ(F2)ELISA試劑盒 ,英文名: F2 ELISA Kit
人胃動素(MTL)ELISA檢測試劑盒HumanMotilin,MTLELISAKit 96T/48T
大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)免疫試劑盒 Rat inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA KIT
英文名稱HumanCINC-2a/bELISAKit人CINC-2a/b規(guī)格:96T/48T
多聚賴載玻片10片
ELISAKitTNF-α山羊腫瘤壞死因子α規(guī)格:48T/96T
莫氏立克次氏體PCR檢測試劑盒sTNF Alpha-RII(humen) 人可溶性壞死因子-受體2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CNR-2/PCDHA 6 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Notch3/4 跨膜受體蛋白Notch-3抗體 規(guī)格 0.1ml
Human talin ELISA Kit 人踝蛋白 96T
Thrap3 英文名稱: 甲狀腺激素受體相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
C6ORF182 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框182抗體 0.2ml
Anti-CNR-2/PCDHA 6 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。