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詳細(xì)介紹
人蛋白聚糖(PG)酶聯(lián)免疫試劑盒ELISA的操作要點(diǎn)?
優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條
件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。
本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試
劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出
準(zhǔn)確的結(jié)果。
規(guī)格 | 英文名稱 | 試劑名稱 |
48Ｔ/96Ｔ | Human proteoglycan (PG) ELISA Kit | 人蛋白聚糖(PG)酶聯(lián)免疫試劑盒 |
人蛋白聚糖(PG)酶聯(lián)免疫試劑盒⑴標(biāo)本的采取和保存
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物
（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假
陽性反應(yīng)。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。
⑵ 試劑的準(zhǔn)備
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包
括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出
的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰
箱保存。
⑶加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物
加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。
⑷保溫
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。
⑸洗滌
可分為浸泡式和流水沖洗式兩種洗滌方式。
⑹顯色和比色
?顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng)，此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)
的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。
?比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比
色架中。以軟板為載體的試驗(yàn)，需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中，才可進(jìn)行比色。
?酶標(biāo)比色儀
簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀，通常指于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。
⑺結(jié)果判斷
①定性測(cè)定
a．間接法和夾心法
陽性判定值；標(biāo)本/陰性對(duì)照比值。
b. 競(jìng)爭(zhēng)法
陽性判定值法；抑制率法。
②定量測(cè)定
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次*
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次*
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次*
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次*
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（羥自由基）20次*
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）WST-1比色法定量檢測(cè)試劑盒50次*
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）NBT比色法定量檢測(cè)試劑盒100次*
細(xì)胞氧化型谷胱甘肽（GSSG）濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒50次*
P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人P53Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MDH1 可溶性蘋果酸脫氫酶抗體 規(guī)格 0.1ml
AZU(Human azurocidin) ELISA Kit 人天青殺素 96T
RNF121 英文名稱： 環(huán)指蛋白121抗體 0.2ml
phospho-alpha B Crystallin (Ser45) 英文名稱： 磷酸化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 0.1ml
Anti-HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人蛋白聚糖(PG)酶聯(lián)免疫試劑盒Alpha-GST ELISA Kit 大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-TRIM32 TRIM32抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh GIMAP5 GTP酶IMAP家族成員5抗體 規(guī)格 0.2ml
CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠碳酸酐酶2 96T
Phospho-NMDAR2A (Tyr1325) 英文名稱： 磷酸化谷酸受體2A抗體 0.1ml
ALS2CR8 英文名稱： 肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 0.2ml
Anti-TRIM32 TRIM32抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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