實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
基本信息:
產(chǎn)品名稱:NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)紫外分光光度法
測(cè)試方法:紫外分光光度法
規(guī)格 : 50管/48樣
貨號(hào):YS-01S6330
測(cè)定意義
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。
測(cè)定原理:
NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
人卵泡抑素(FST)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 茶樹菇Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人鐵調(diào)素(Hepc)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒圍小叢殼Phospho-Akt (Ser473) Blocking Peptide
人生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒乳桿屬Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) Blocking Peptide
人粒集落激因子(G-CSF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒假單胞屬S6 Ribosomal Protein Blocking Peptide
人生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒栗疫Zap-70 Blocking Peptide
人粒巨噬集落激因子(GM-CSF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 釀酒酵母Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) Blocking Peptide
人可溶性糖蛋白130(sgp130)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒東方伊薩酵母Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) Blocking Peptide
人肝生長(zhǎng)因子(HGF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 海蘇特氏Phospho-HER3/ErbB3 (Tyr1289) Blocking Peptide
人β干擾素(IFN-β)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒節(jié)桿屬ATF-4 (D4B8) Rabbit mAb
人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 葡萄座腔DEPTOR/DEPDC6 (D9F5) Rabbit mAb
人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽孢桿Phospho-GRB10 (Ser476) (D4E6) Rabbit mAb
人白介素1α(IL-1α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒鰻利斯頓氏Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb
人白介素1受體拮抗劑(IL-1ra)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒尖鐮孢(尖孢鐮刀 )(可定)Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb
人白介素1受體II(IL-1R2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒粒狀青霉TCF12/HEB (D2C10) Rabbit mAb
人前列腺特異性抗原(PSA/KLK3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒三孢布拉霉FKBP4 Antibody
NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)紫外分光光度法氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human anti-2nCoV(N) IgM ELISA Kit內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
唾液酸糖蛋白受體1抗體Human FOLR3(Folate receptor gamma) ELISA Kit卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
芳香基硫酸酯酶F抗體Human CTHRC1(Collagen triple helix repeat-containing protein 1) ELISA Kit卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
A激酶錨定蛋白5抗體Human CAMK2B(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type II subunit beta) ELISA Kit氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體Human CDCA8(Cell division cycle-associated protein 8) ELISA Kit神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
ASTE1蛋白抗體Human CH25H(Cholesterol 25-hydroxylase) ELISA Kit前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4B抗體Human MAP4K4 ELISA Kit小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒,
微絲相關(guān)蛋白1抗體Human Matrilin 2 ELISA Kit小鼠葉酸(FA)ELISA試劑盒,