需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱:乙醇酸氧化酶微量法
測(cè)試方法:微量法
規(guī)格 :100管/96樣
貨號(hào):YS-01S7094
測(cè)定意義
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.1)是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶,也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對(duì)研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。
測(cè)定原理
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
兔乙酰膽受體抗體(AChRab)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 鼠李糖乳桿FASTDIGEST SSPI
兔紅膜蛋白(EMP)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 原小單孢FASTDIGEST BSP143I
兔巨噬集落激因子受體(MCSFR)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒中慢生華癸根瘤FASTDIGEST HINFI
兔V-Myc骨髓瘤病癌基因同源物(MYC)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒巨型艾美耳球蟲FASTDIGEST MBOI
兔信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒高地芽孢桿FASTDIGEST MBOII
兔白介3介導(dǎo)核因子(NFIL3)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒土曲霉FASTDIGEST BSPTI
兔τ-蛋白激1(τPK1)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒產(chǎn)假單胞FASTDIGEST PFL23II
兔神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒布雷正青霉FASTDIGEST BSEGI
兔髓樣前體抑制因子2(MPIF2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒美澳型核果褐腐病FASTDIGEST BSENI
兔纖維蛋白原α(FGα)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黏結(jié)珊瑚狀放線FASTDIGEST BSH1285I
兔激肽原1(KNG1)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 栗疫FASTDIGEST ACC65I
兔結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 木耳FASTDIGEST VSPI
兔半乳凝集7(GAL7)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒巨大芽孢桿FASTDIGEST BSH1236I
兔表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒香菇FASTDIGEST BSP1407I
兔解整合金屬蛋白10(ADAM10)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 土生叢毛單胞FASTDIGEST BSP1407I
乙醇酸氧化酶微量法胃泌抑制肽受體抗體Human TRIM24 ELISA Kitβ分泌抗體流式組化
粒-巨噬集落激因子受體α抗體Human TRIM2 ELISA Kit周期依賴性激8抗體流式組化Anti-CDK8
甘肽硫轉(zhuǎn)移pi基因抗體Human TRAT1 ELISA Kit外胚層發(fā)育不良抗體流式組化
接頭蛋白Gab 2抗體Human TRAV20 ELISA Kit人類狀瘤病抗體流式組化
葡萄糖6磷α/G6Pase-α抗體Human TRIM23 ELISA Kit胰島受體-α抗體流式組化
糖磷脂酰肌抗體Human SRSF2(Serine/arginine-rich splicing factor 2) ELISA Kit雙微體2癌基因抗體流式組化
乙二1抗體Human TRBV5-4 ELISA Kit血小板源性生長(zhǎng)因子-BB抗體流式組化
核呼吸因子2抗體Human DCT(L-dopachrome tautomerase) ELISA Kit菠蘿蛋白
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。