詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T | YS-01P6713 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
N-BOC-O-芐基-L-絲氨 98%D-果糖-1,6-二磷三鈉鹽,無水 98%大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白11(IP-11/CXCL11)免疫試劑盒
N-BOC-O-叔丁基-L-絲氨 BRD-果糖-1,6-二磷三鈉,八水 98%大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒
Boc-Ser(Tos)-OMe BRD-果糖-6-磷二鈉,二水 98%大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)免疫試劑盒
N-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨 98%2--6-氨基 98%大鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)免疫試劑盒
BOC-O-叔丁基蘇氨 99.0%D-葡萄糖 98%大鼠鈣腔蛋白(CALU)免疫試劑盒
BOC-D-色氨 BRΑ-D-五甲酰吡喃葡萄糖 98%大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒
N-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-酪氨 98%D-葡萄糖-6-磷 ~1 M in H2O ( 260 mg/ml) 大鼠鈣激活中性蛋白1(CAPN1)免疫試劑盒
Boc-O-叔丁基-L-酪氨 99.0%β-D-葡萄糖-6-磷鈉鹽 97%大鼠鈣非依賴型磷脂A2(iPLA2)免疫試劑盒
BOC-D-亮氨 98%甘脲 98%大鼠鈣調(diào)依賴性蛋白激2(CAMK2)免疫試劑盒
S-叔丁基-L-半胱氨鹽鹽 98%D-半乳糖鹽鹽 99%大鼠鈣調(diào)(CAM)免疫試劑盒
N-甲?;劝?98%D-半乳糖鹽鹽 for cell culture,99%大鼠鈣調(diào)磷(CaN)免疫試劑盒
N-芐基甘氨鹽鹽 98%D-氨基葡萄糖硫鹽 98%大鼠鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激激(CaMKK)免疫試劑盒
O-叔丁基-L-絲氨 99%3-正十六烷基噻吩 97%大鼠富亮氨α2糖蛋白1(LRG1)免疫試劑盒
O-叔丁基-L-絲氨甲酯鹽鹽 98%異基-β-D-硫代半乳糖 98%大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)免疫試劑盒
O-叔丁基-L-酪氨 95%2,3:4,5-二-O-異亞基-β-D-吡喃果糖 99%大鼠脯氨羥化(PHD)免疫試劑盒
水生動物病害基因組DNA快速提取試劑盒48T人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒,3,4-二甲氧基磺4號染色體開放閱讀框51抗體
人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒,3,4-二甲氧基磺分支GBE1抗體
小鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒,3,4-二甲氧基磺磷化絲切蛋白抗體
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒,6-吡啶-3-甲補(bǔ)體成分5受體1抗體
大鼠β(BTC)ELISA試劑盒,6-吡啶-3-甲分裂周期2樣蛋白激6抗體
大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒,6-吡啶-3-甲補(bǔ)體C3IP1抗體
雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒,甲基(三基膦)金(I)磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體
兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒,2,6-二甲氧基周期依賴性激11抗體