詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:蝦源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管
貨號:YS-01P6410
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗方法步驟:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
式碳鉛 AR,99.0%2,8-雙(三甲基)-4-羥基喹啉 99%豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物(LPO)免疫試劑盒
式碳鉛 ACS3-溴磺酰 98%豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)免疫試劑盒
發(fā)煙硝 AR二乙基膦?;沂宥□?95%豚鼠肝生長因子(HGF)免疫試劑盒
間酚 IND2-溴-4-甲 98%豚鼠甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒
鹽萘乙二 AR,98%4-溴水楊 97%豚鼠干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒
黑色(溶) Biological stain4-溴-2-(三甲基)甲 97%豚鼠鈣調(diào)(CAM)免疫試劑盒
鹽萘乙二 ACS, >98%3-溴 98%豚鼠端粒(TE)免疫試劑盒
亞硝 CP,95%5-基吲哚 99%豚鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
四草,二水 PT2-異煙 97%豚鼠脂(CHE)免疫試劑盒
偏磷 AR肉桂酰 97%豚鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒
鍺試劑 AR3-肉桂 98%豚鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
鍺試劑 97%2-芐 99%豚鼠單氧化(MAO)免疫試劑盒
高 99.99% metals basis2--5-甲 99%豚鼠催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒
N-基鄰氨基甲(釩試劑) AR,95%2--5-甲 97%豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
N-基鄰氨基甲(釩試劑) 98%4-吲哚 98%豚鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒
蝦源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管2216E瓊脂4-肉桂載脂蛋白O抗體
多粘菌B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)4-肉桂β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體
血瓊脂基礎(chǔ) 分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))3,5-二基-4-(1-萘基)-1H-1,2,4-三唑共濟(jì)失調(diào)性眼球運(yùn)動功能喪失相關(guān)蛋白AOA1抗體
細(xì) 菌L型分離瓊脂用于L型細(xì)菌分離培養(yǎng)Fmoc-L-氨三號染色體開放閱讀框抗體
L-亮氨(S)-N-縮水甘油鄰二甲酰亞腺磷核糖轉(zhuǎn)移抗體
L-精氨L-谷氨鹽(S)-N-縮水甘油鄰二甲酰亞磷化水通道蛋白2抗體
人柯薩奇病IgM(Cox V-IgM)ELISA試劑盒,Cox V-IgM ELISA(S)-N-縮水甘油鄰二甲酰亞ADP核糖基化因子1抗體
人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒,PY ELISA3--5-(三甲基)甲乙型肝炎病X相關(guān)蛋白2抗體
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。