一.目的
為規(guī)范Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)的基本操作、維護保養(yǎng)、異常處理程序,防止人為操作失誤,確保Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn),特制定本程序。
二.適用范圍
本程序適用于Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作。
三.責(zé)任
1. 本程序的實施者為Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作者,各實驗室負(fù)責(zé)人對本程序的實施情況進行監(jiān)督。
2. 日常運行及維護、定期維護、定期點檢及保養(yǎng)由Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作者負(fù)責(zé)。
四.內(nèi)容
1. 打開成像儀器電源,將樣品放入工作臺。
2. 雙擊桌面上圖標(biāo),打開Quantity One 軟件,或從開始-程序-The Discovery Series/Quantity One進入。
3. 從File下拉菜單中選擇ChemiDox XRS,打開圖像采集窗口。
4. Select Application 選擇相關(guān)應(yīng)用:
a UV Transillumination 透射UV:針對DNA EB膠或其他熒光;
b White Transillumination 透射白光:針對透光樣品如蛋白凝膠,X-光片;
c White Epillumination 側(cè)面白光:針對不透光樣品或蛋白凝膠;
d Chemiluminescnece 化學(xué)發(fā)光,不打開任何光源。
5. 單擊Live/Focus按鈕,激活實時調(diào)節(jié)功能,此功能有三個上下鍵按鈕:IRIS(光圈),ZOOM(縮放),F(xiàn)OCUS(聚焦),可在軟件上直接調(diào)節(jié)或在儀器面板上手工調(diào)節(jié),調(diào)節(jié)步驟: a調(diào)節(jié)IRIS至適合大??; b點ZOOM將膠適當(dāng)放大; c調(diào)節(jié)FOCUS至圖像清晰。
6. 如是DNA EB膠或其他熒光,單擊Auto Expose,系統(tǒng)將自動選擇曝光時間成像,如不滿意,單擊Manual Expose,并輸入曝光時間(秒),圖像滿意后保存。
如是蛋白凝膠,接第5步驟直接將清晰的圖像保存即可;如是化學(xué)發(fā)光樣品,將濾光片位置換到Chemi位(儀器上方右側(cè)),將光圈開到大,輸入Manual Expose時間,可對化學(xué)發(fā)光的弱信號進行長時間累積如30min,或單擊Live Acquire 進行多幀圖像實時采集,在對話框內(nèi)定義曝光時間長短,采集幾幀圖像,在采集的多幀圖像中選取滿意的保存。
五.注意事項:
1. 請勿將潮濕樣品長期放在暗箱內(nèi),以防腐蝕濾光片,更不要將液體濺到暗箱底板上,以免燒壞主板。
2. 使用后將平臺擦干凈,以防有水損壞CCD;切膠時在平臺上墊上保鮮膜,以防劃損平臺。
3. 儀器使用完后請及時關(guān)閉電源,特別是ChemiDox XRS的CCD電源。
4. 只有在進行化學(xué)發(fā)光實驗時才需要提前打開冷CCD預(yù)熱30min再使用,其他操作無需預(yù)熱。
請勿使用控制成像儀的電腦上網(wǎng),也不要自行重裝電腦操作系統(tǒng)或給操作系統(tǒng)升級。