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CAS | CAS :9001-99-4 | 純度 | >95% |
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供貨周期 | 一個月 | 規(guī)格 | 50毫升 |
貨號 | MB120 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥,綜合 |
sydlabs:核糖核酸酶 A 溶液
核糖核酸酶 A (RNase A) 的用途是什么?除了 RNA 序列分析和 RNase 保護測定之外,RNase A 還常用于質粒和基因組 DNA 純化以及蛋白質提取過程。
胰腺核糖核酸酶是一種分泌酶,屬于胰腺核糖核酸酶家族。 RNase A 是一種核酸內切酶,可裂解嘧啶堿基 3' 側的內部磷酸二酯 RNA 鍵。 RNase A 更喜歡以聚 (C) 作為底物并水解 2',3'-環(huán)狀核苷酸。 RNase A 作用于單鏈和雙鏈 RNA。
重組核糖核酸酶 A (RNase A) 是由酵母細胞產生的,帶有編碼基因工程牛胰腺核糖核酸酶的克隆基因。
CAS 號:9001-99-4。
歐共體:3.1.27.5。
分子量:13.7 kDa。
等電點:9.6。
pH范圍:6-10;在pH 7.6-8.0范圍內具有高活性。
單位定義:當酵母 RNA 在 37°C、pH 5.0 下水解時,1 個單位的 RNase A 酶會導致 260 nm 處的吸光度增加 1.0 個單位。五十個單位大約相當于 1 個庫尼茨單位。
比活性:≥ 40 Kunitz 單位/毫克蛋白質。
溫度曲線:建議溫度范圍15-70°C; 60°C 時具有最大活性。
消光系數:E 1% =7.1; 280納米。
純度:>95%(通過還原 SDS-PAGE)。每批 RNase A(溶液和粉末)均經過測試,以確保不含蛋白酶、核酸內切酶、核酸外切酶、DNase 和 DNA。使用前無需加熱。在 40 µg 蛋白酶 K 與 1 ug λ DNA 在 37°C 下孵育 6 小時的質量控制程序中未檢測到 DNase。該制劑被認為不含 DNase。
劑型:溶液。
溶液制備:要制備 10 mg/mL RNase A 庫存溶液,請將 10 mg RNase A 溶解在 1 mL 緩沖液中:10 mM Tris-HCl、15 mM NaCl,pH 7.5。
根據應用,推薦的 RNase A 濃度為 1 至 100 µg/mL。要從質粒制備物中去除 RNA,請使用 10 μg/ml 工作溶液并在室溫下孵育樣品 1 小時。為了制備雙鏈 cDNA 的“平端",請使用 100 ng/ml 工作溶液。
活化劑:鉀鹽和鈉鹽。該酶在多種反應條件下都具有活性。在低鹽濃度(0 至 100 mM NaCl)下,RNase A 切割單鏈和雙鏈 RNA 以及 RNA-DNA 雜交體中的 RNA 鏈。然而,當 NaCl 濃度為 0.3 M 或更高時,RNase A 會特異性切割單鏈 RNA。
抑制劑:通過 His 12 和 His 119 的烷基化。RNase A 對玻璃表面具有高親和力。在中性 pH 值和高濃度 (>10 mg/ml) 下,酶會沉淀。該酶受到焦碳酸二乙酯 (DEPC)、胍鹽 (4 M GuSCN)、β-巰基乙醇、重金屬和 RNase 抑制劑(如 RIBOPROTECT (RT33))的抑制。為了從樣品中去除酶,請使用旋轉柱或多次苯酚/氯仿萃取進行分離。
運輸:重組 RNase A 溶液用冰袋運輸。收到后,立即將其存放在下面建議的溫度下。
穩(wěn)定性和儲存:
使用手動除霜冰箱并避免重復凍融循環(huán)。
如果儲存在 -20 至 -70°C 下,自收到之日起 24 個月。
如果儲存在 2–8°C,則自收到之日起 12 個月。
如果儲存在 -20 至 -70°C 下,重構后可保存 12 個月。
sydlabs:核糖核酸酶 A 溶液