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生物安全柜使用維護(hù)注意事項(xiàng):
一、 準(zhǔn)備工作
1.在開始工作以前,要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。
2.將所有必需的物品置于安全柜內(nèi),以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開口的次數(shù)。物品放置要注意以下幾點(diǎn):
1) II級生物安全柜臺面前面和后面的進(jìn)氣格柵不能被物品阻擋。
2) 不要在工作區(qū)內(nèi)排放過多的物品。
3) 所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置,并使其在操作中不會阻擋后部格柵。
4) 容易受紫外線損傷的實(shí)驗(yàn)樣本可以在紫外線殺菌后的實(shí)驗(yàn)之前放入。
5) 可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(如:混勻器、離心機(jī)等)應(yīng)靠近安全柜的后部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品,應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。
6) 潔凈的物品應(yīng)放置在距離產(chǎn)生氣溶膠器皿至少15 cm外,降低交叉污染的可能性。
3.關(guān)閉操作前窗,打開生物安全柜的紫外燈,對生物安全柜工作臺面,側(cè)壁表面以及后壁內(nèi)側(cè)進(jìn)行殺菌處理。
4.稍微打開操作前窗,讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作。
二、操作注意事項(xiàng)
1.在生物安全柜內(nèi),避免使用酒精燈等明火滅菌器。使用明火會對氣流產(chǎn)生影響,并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時,也易造成危險。在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時,可以使用紅外線電加熱器,或者干脆使用一次性塑料接種環(huán)。
2.在使用生物安全柜時應(yīng)穿著個體防護(hù)服并戴手套防止被污染。在進(jìn)行一級和二級生物安全水平的操作時,可穿著普通實(shí)驗(yàn)服。手套應(yīng)套在實(shí)驗(yàn)服袖口外面。有些操作可能還需要戴口罩和護(hù)目鏡。
3.手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約1min,以便安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過"手和雙臂的表面以后,才可以開始對物品進(jìn)行處理。
4.工作時,耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤放在安全柜內(nèi)不能拿出安全柜,否則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜,這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性,從而影響對人員和物品的防護(hù)。
5.工作時,盡量減少手臂的移動,移動時要緩慢,防止干擾柜內(nèi)氣流。在移動雙臂進(jìn)出安全柜時,需要小心維持前面開口處氣流的完整性,雙臂應(yīng)該與工作區(qū)開口垂直地緩慢進(jìn)出前面的開口。
6.一旦實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生溢灑物,用消毒紙巾置于其表面吸附清理。
7.在工作臺面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行,所有操作在工作臺面的中后部進(jìn)行。
8.盡量使安全柜處于持續(xù)工作狀態(tài),并對所有物品進(jìn)行表面消毒處理,提供人員保護(hù)。從安全柜內(nèi)部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時,一定要進(jìn)行表面消毒處理。
三、使用完畢后的處理
1.系緊用過的生物廢物袋。
2.對安全柜內(nèi)壁、后壁、工作臺面和前窗內(nèi)側(cè)進(jìn)行清潔和消毒處理。
3.由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖,因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時,包括儀器設(shè)備在內(nèi)的所有物品都應(yīng)清除表面污染,并移出安全柜。
4.從安全柜內(nèi)移出手臂之前,一定要進(jìn)行表面消毒處理,然后垂直于工作區(qū)開口緩慢地移出。
5.在每次使用后,要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭,所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里的任何微生物。在每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束時,應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來清除表面的污染。在對目標(biāo)生物體有效時,可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后,還必須用無菌水再次進(jìn)行擦拭。
6.關(guān)閉前操作窗口并開啟紫外燈。
四、生物安全柜內(nèi)溢灑的處理
1.處理溢灑物時不要將頭伸入安全柜內(nèi),也不要將臉直接面對前操作口,而應(yīng)處于前視面板的后方。選擇消毒滅菌劑時需要考慮其對生物安全柜的腐蝕性。
2.如果溢灑的量不足1 ml時,可直接用消毒滅菌劑浸濕的紙巾(或其他材料)擦拭。
3.如果溢灑量大或容器破損,建議按如下操作:
1) 使生物安全柜保持開啟狀態(tài);
2) 在溢灑物上覆蓋浸有消毒滅菌劑的吸收材料,作用一定時間以發(fā)揮消毒滅菌作用,必要時,用消毒滅菌劑浸泡工作表面以及排水溝和接液槽;
3) 在安全柜內(nèi)對所戴手套消毒滅菌后,脫下手套;如果防護(hù)服已被污染,脫掉所污染的防護(hù)服后,用適當(dāng)?shù)南緶缇鷦┣逑幢┞恫课唬?/p>
4) 穿好適當(dāng)?shù)膫€體防護(hù)裝備,如雙層手套、防護(hù)服、護(hù)目鏡和呼吸保護(hù)裝置等;
5) 小心將吸收了溢灑物的紙巾(或其他吸收材料)連同溢灑物收集到專用的收集袋或容器中,并反復(fù)用新的紙巾(或其他吸收材料)將剩余物質(zhì)吸凈;
6) 破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理;用消毒滅菌劑擦拭或噴灑安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè);作用一定時間后,用潔凈水擦干凈消毒滅菌劑;
7) 如果需要浸泡接液槽,在清理接液槽前要先報告主管人員;可能需要用其他方式消毒滅菌后再進(jìn)行清理。如果溢灑物流入生物安全柜內(nèi)部,需要后采取適用的措施。
五、定期維護(hù)
1.每三個月更換一次預(yù)過濾器。
2.每周采用空氣落菌數(shù)相似的方法進(jìn)行無菌檢查。
3.生物安全柜在移動以及更換過濾器之前,必須清除污染。常用的方法是采用熏蒸,應(yīng)該由有資質(zhì)的人員來清除污染。
4.每年更換一次紫外燈。
5.有下列情況之一時,應(yīng)對生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場檢測:
1) 生物安全實(shí)驗(yàn)室竣工后,投入使用前,生物安全柜已安裝完畢;
2) 生物安全柜被移動位置后;對生物安全柜進(jìn)行檢修后;生物安全柜更換高效過濾器后;
3) 生物安全柜一年一度的常規(guī)檢測。
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