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ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人蛋白表達及純化
閱讀:755 發(fā)布時間:2023-3-16ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒═ag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
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