詳細介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點:
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Raillietina tetragona |
貨號 | CP934653 |
產(chǎn)品特征:
四角瑞氏絳蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機制,抑制非特異性擴增 。
重復(fù)性好:擴增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴增效率高:擴增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是盒的相關(guān)產(chǎn)品:
SOD1/SOD 超氧化物歧化酶1抗體(銅/鋅過氧化物歧化酶SOD)人程序性細胞死亡因子4(PDCD4)ELISA試盒
Socs 3 細胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)ELISA試盒
Socs 2 細胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白2抗體人程序性死亡-1(PD-1)ELISA試盒
Socs 1 細胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白1抗體人成纖維細胞生長因子9(FGF9)ELISA試盒
SOAT2/ACAT2 膽固醇?;D(zhuǎn)移酶2抗體人成纖維細胞生長因子8(FGF8)ELISA試盒
SOAT1/ACAT1 膽固醇?;D(zhuǎn)移酶1抗體人成纖維細胞生長因子6(FGF6)ELISA試盒
SNX27 SNX27蛋白抗體人成纖維細胞生長因子4(FGF4)ELISA試盒
SNX25 分揀微管連接蛋白抗體人成纖維細胞生長因子23(FGF-23)ELISA試盒
SNX1/Sorting nexin1 分選連接蛋白1抗體人成纖維細胞生長因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)ELISA試盒
SNTG2/Syntrophin 5 肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體人成纖維細胞生長因子13(FGF-13)ELISA試盒
SnoN Smad核轉(zhuǎn)錄共抑制因子抗體人成纖維細胞生長因子10(FGF10)ELISA試盒
SNF5 轉(zhuǎn)錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體人巢蛋白1(NID1)ELISA試盒
SNF1LK2/SIK2 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK2抗體人超敏熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試盒
Snf1lk/SIK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK1抗體人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)ELISA試盒
四角瑞氏絳蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒SNAPC3 SNAPC3蛋白抗體人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA試盒2,2´,3,6-四聯(lián)苯(PCB45 ) 標準品1ml
2,2´,3,6-四聯(lián)苯[70362-45-7]5mg
2,2´,3,6´-四聯(lián)苯(PCB46 ) 標準品1ml
2,2´,3,6´-四聯(lián)苯[41464-47-5]5mg
2,2´,3,5-四聯(lián)苯(PCB 43) 標準品1ml
2,2´,3,5-四聯(lián)苯[70362-46-8]5mg
2,2´,3,5´-四聯(lián)苯(PCB44 ) 標準品1ml
2,2´,3,4-四聯(lián)苯(PCB41 ) 標準品1ml
2,2´,3,4-四聯(lián)苯[52663-59-9]5mg
2,2´,3,4´-四聯(lián)苯(PCB 42) 標準品1ml