詳細(xì)介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人趨化因子配體17英文名稱:Human chemokine (C-X-C motif ligand 17 (CXCL17 ELISA kit產(chǎn)品別名:人CXCL17 elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human chemokine (C-X-C motif ligand 17 (CXCL17 ELISA kit |
貨號 | CS-E4074 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng):
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
組織沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)活性熒光定量檢測試盒PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶
細(xì)胞組蛋白酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)總活性熒光定量檢測試盒PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人胃蛋白酶原C
組織組蛋白酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)總活性熒光定量檢測試盒PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit 人胃蛋白酶原A
細(xì)胞組蛋白酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)總活性比色法定量檢測試盒PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit 人尿激酶型纖溶酶原激活物受體
組織組蛋白酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)總活性比色法定量檢測試盒uPA(Human urokinase plasminogen activator) ELISA kit 人尿激酶型纖溶酶原激活物
人趨化因子配體17ELISA試劑盒血小板活化因子酰水解酶(PAF AH)活性比色法定量檢測試盒Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶2
血液卵脂膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性比色法定量檢測試盒MMP-8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶
血液卵脂膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性熒光定量檢測試盒(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7
血液卵脂膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試盒MMP-3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶3
細(xì)胞酰輔酶A膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性比色法定量檢測試盒MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A
組織酰輔酶A膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性比色法定量檢測試盒MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13
植物酰輔酶A膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性比色法定量檢測試盒MMP-10(Human Matrix metalloproteinase 10) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶10
酵母酰輔酶A膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性比色法定量檢測試盒MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶1
細(xì)胞酰輔酶A膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性熒光定量檢測試盒Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣酪酸激酶3
組織酰輔酶A膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性熒光定量檢測試盒Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS樣酪酸激酶3配體Canine CASP3(Caspase 3) ELISA Kit
Canine CASP3(Caspase 3) ELISA Kit英文名稱:AGPA絲/蘇蛋白激酶MARK4體
高化學(xué),合成試, 3,4-二酯
SHBG英文名稱:THRA1+2G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體
英文名稱:Aquaporin 5肽水解酶體
高化學(xué),固相合成, 4,5-二咪
SHP-1英文名稱:TIP47G蛋白偶聯(lián)受體15抗體
英文名稱:Amylin(1-37) amide化絲裂原活化蛋白激酶激酶2體
高化學(xué),合成試, 4,4-二
SHP2英文名稱:Testin粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β抗體