詳細(xì)介紹
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人中性粒細(xì)胞顆??贵w英文名稱:ANGA ELISA Kit產(chǎn)品別名:人ANGA elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | ANGA ELISA Kit |
貨號 | CS-E3680 |
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
腎上腺髓質(zhì)素(22-42)Anti-CD23/Fc EpsilonR II /FITC 熒光素標(biāo)記CD23抗體IgG
α-1抗胰蛋白酶(抗原)Anti-CD24/FITC 熒光素標(biāo)記CD24蛋白抗體IgG
血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制(抗原)Anti-CD25/IL-2RA/FITC 熒光素標(biāo)記CD25/白介素2-受體抗體IgG
ACINUS 多肽抗原Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標(biāo)記CD26抗體IgG
小鼠IgAAnti-CD27/TNFRSF7/FITC 熒光素標(biāo)記CD27抗體IgG
促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)Anti-CD28/FITC 熒光素標(biāo)記CD28蛋白抗體IgG
肌動蛋白(抗原)Anti-Integrin Beta1/CD29(integrin beta 1)/FITC 熒光素標(biāo)記整合素β1蛋白抗體IgG
人中性粒細(xì)胞顆??贵wELISA試劑盒人血清白蛋白標(biāo)記生物素Anti-CD30/TNFRSF8/FITC 熒光素標(biāo)記CD30抗體IgG
粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3抗原Anti-CD31/FITC 熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG
肺表面活性蛋白B抗原Anti-CD31(PECAM-1)/PE 熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG
陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Anti-CD31(PECAM-1)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG
基質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原)Anti-CD31/FITC 熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原)Anti-CD33/Siglec-3/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD33抗體IgG
14-3-3 蛋白(多肽抗原)Anti-CD33/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD33抗體IgG
植物14-3-3蛋白抗原Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔CD33L抗體IgG 奧沙利鉑人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素Oelisa試盒
氟替卡松人大腸菌素elisa試盒
(S,S,S)-2-氮雜雙環(huán)[3,3,0]辛烷-3-羧酸芐酯鹽酸鹽人促胃液素受體elisa試盒
(S,S)-2-氮雜雙環(huán)[3,3,0]辛烷-3-羧酸芐酯鹽酸鹽人超敏C反應(yīng)蛋白elisa試盒
替加色羅人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2elisa試盒
坦索洛新人抗凝血素抗體elisa試盒
環(huán)司胺人百日咳素elisa試盒
環(huán)胺人骨退化特異標(biāo)志物elisa試盒
阿曲汀人細(xì)胞角蛋白17elisa試盒
克羅米通人大腸癌專一抗原4elisa試盒
吉非羅齊人布魯氏菌抗體IgGelisa試盒
尼扎替人抗凝血素抗體IgMelisa試盒
洛伐他汀人水通道蛋白0elisa試盒
辛伐他汀人維生素B6elisa試盒
異維A酸人抗百日咳病elisa試盒
注意事項(xiàng):
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。