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          大鼠小氣道上皮細(xì)胞

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          更新時(shí)間:2024-11-05 10:19:26瀏覽次數(shù):2970

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) YS-01X8269 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
          大鼠小氣道上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MPV17L蛋白抗體 IQCK蛋白抗體 人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞 ENY2蛋白抗體 大鼠羊膜胚胎細(xì)胞 染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體 人小氣道平滑肌細(xì)胞 NBPF16蛋白抗體

          詳細(xì)介紹

          大鼠小氣道上皮細(xì)胞

          大鼠小氣道上皮細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來(lái)源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號(hào)

          小氣道

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          上皮細(xì)胞樣

          YS-01X8269

          細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠小氣道上皮分離自小氣道;臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小,但易阻塞的特點(diǎn)。在平靜吸氣時(shí),空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部,產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無(wú)軟骨支持,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,管腔通暢性不象軟骨性氣道,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層,作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御、表達(dá)粘附分子,并可能通過(guò)HLA-DR表達(dá)呈遞抗原;它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病,如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞;小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道的生理功能特點(diǎn):①小氣道阻力??;②氣流速度慢;③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。

          方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小氣道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小氣道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

          換液頻率:每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性:貼壁

          細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

          傳代特性:可傳1-2

          消化液:0.25%

          培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

          大鼠小氣道上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

          大鼠小氣道上皮細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

           ?、?消化培養(yǎng)法

            ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

           ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          大鼠小氣道上皮細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒   96T/48T

          蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)試劑盒   96T/48T

          雙花扁豆凝集素(DBA)試劑盒   96T/48T

          蛇毒因子(CVF)試劑盒   96T/48T

          小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 試劑盒 96T/48T

          Human CpG oligodeoxynucleotide (CpG-ODN) ELISA Kit 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)試劑盒

          HumaeninELISAKit 人腎素(Renin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          HumanComplemefragme3brccptor,C3bR試劑盒人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          組織CaMKIV激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

          humanproviraliegrationsite1,Pim1ELISAKit人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          CTP合成酶2抗體

          牛血清白蛋白抗體

          CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 Protein

          胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)重組蛋白 Recombinant Caspase Activated DNase (CAD)

          COL5A2重組人 COL5A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

          IDO1 Protein Human 重組人 IDO1 / IDO 蛋白

          IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重組野豬 IL10 / Interleukin-10 蛋白

          胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)重組蛋白 Recombinant Caspase Activated DNase (CAD)

          IDO1 Protein Human 重組人 IDO1 / IDO 蛋白

          CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 Protein

          IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重組野豬 IL10 / Interleukin-10 蛋白

          COL5A2重組人 COL5A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

          大鼠小氣道上皮細(xì)胞大鼠白介素23(IL-23)試劑盒 ,英文名: IL-23 ELISA Kit

          Mouse activated leukocyte cell adhesion molecule (ALCAM) ELISA Kit 小鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒

          ELISA 小鼠白介素-1a(mouse IL-1a)  進(jìn)口分裝

          CLIAKitforIL-8/CXCL8(HumanIerleukin8)ELISAKIT人白介素8

          通用型胡蘿卜細(xì)菌性葉斑病(Xahomonascampesispv.Carotae;Xccar)試劑盒20

          ELISAKitALDH大鼠乙脫氫酶

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

            4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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