大鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品：P388D1 兔前列腺成纖維細胞 視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體 人腎癌細胞;SN12-PM6 鋅指蛋白37抗體 SNB-19人腦膠質(zhì)瘤 CD307d蛋白抗體 L2 (大鼠肺泡上皮細胞)

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產(chǎn)品名稱：大鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

組織來源：外周血

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁半懸浮

細胞形態(tài)：圓形、梭形、多角形，形態(tài)多樣

傳代特性：屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠外周血樹突狀(未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞簡介：

大鼠外周血DC分離自外周血，由外周血單核細胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞，典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成，多數(shù)呈懸浮生長， 細胞呈圓形，細胞體積進一步增大，表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志，主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應(yīng)中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進而激活T淋巴細胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答，不能激活T細胞的第二信號，可導(dǎo)致T細胞無能，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低，一般在30%以下。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導(dǎo)而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的大鼠外周血樹突狀(未成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠促卵泡素   英文名稱：   Folliopin   規(guī)格：      英文縮寫：   FSH

凋亡相關(guān)因子   英文名稱：   apoptosis-inducing factor Fas   規(guī)格：      英文縮寫：   Fas

凋亡相關(guān)因子配體   英文名稱：   apoptosis-inducing factor Fas Ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   Fas Ligand

小鼠酸性成纖維生長因子   英文名稱：   acid fibroblast growth factor   規(guī)格：      英文縮寫：   a-FGF

小鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒

Humanneuronalapoptosisinhibitoryprotein,NAIPELISAKit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-Endostatinaibody,ES-Ab試劑盒人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物堿性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法法定量試劑盒20次

Humanvionectin,VELISAKit人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD33抗體

內(nèi)臟脂肪組織源性絲蛋白酶抑制蛋白抗體

IFNA4重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

生長停滯DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白α(GADD45α)重組蛋白 Recombinant Growth Arrest And DNA Damage Inducible Protein Alpha (GADD45a)

RGS1重組人 RGS1 蛋白 Protein

ENG Protein Human 重組人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白

HA Protein H6N1 重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

生長停滯DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白α(GADD45α)重組蛋白 Recombinant Growth Arrest And DNA Damage Inducible Protein Alpha (GADD45a)

ENG Protein Human 重組人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白

IFNA4重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H6N1 重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

RGS1重組人 RGS1 蛋白 Protein

大鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)大鼠白介素27(IL-27)試劑盒 ，英文名： IL-27 ELISA Kit

Mouse leukoiene B4 (LTB4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒

ELISA 小鼠IgE(mouse IgE)  進口分裝

CLIAKitforIL-9(HumanIerleukin9)ELISAKIT人白介素9

通用型果膠化學(xué)比色法定量試劑盒20次

ELISAKitAChE大鼠乙酰酯酶