大鼠尿道平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人淋巴瘤細(xì)胞+LUC+eGFP;Raji-LUC-eGFP-puro VM-CUB-1人膀胱癌細(xì)胞 SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體 T/G HA-VSMC (人血管平滑肌細(xì)胞) 轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體 COS-7 (非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) 環(huán)指蛋白62抗體 鋅指蛋白ZNF265抗體

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產(chǎn)品名稱：大鼠尿道平滑肌細(xì)胞

組織來源：尿道

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠尿道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡介：

大鼠尿道平滑肌分離自尿道管組織；尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內(nèi)口，止于尿道外口，行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部，尿道在尿道膜部有一環(huán)橫行紋肌構(gòu)成的括約肌，稱為尿道外括約肌，由意識控制。尿道有三個解剖上的較狹部和膨大部，前者分別位于外口、膜部和內(nèi)口，后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面，還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部)，一部分為多列或復(fù)層柱狀上皮，在有尿道海綿體的一部分尿道，主要為復(fù)層柱狀上皮，在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內(nèi)有許多環(huán)狀細(xì)胞，舟狀窩的遠(yuǎn)端部開始有未角化的復(fù)層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應(yīng)豐富，主要為結(jié)締組織。肌肉層有縱行肌和外環(huán)形肌。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道平滑肌采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠白介素-6(mouse IL-6)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠白介素-7(mouse IL-7)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠白介素-8(mouse IL-8)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠白介素-9(mouse IL-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neurofilame protein (NF) ELISA Kit 人神經(jīng)絲蛋白(NF)試劑盒

HumanApolipoproteinH,apo-HELISAKit 人載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-IVIgGaibody試劑盒人抗IVIgG抗體試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒規(guī)格：96T/48T

4號染色體開放閱讀框51抗體

磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體

UCHL1重組大鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 Protein

HCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原 0.5mgHCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原)

SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein

EPHB3 Protein Human 重組人 EphB3 / HEK2 蛋白 (aa 585-998, His & GST 標(biāo)簽)

PGK1 Protein Mouse 重組小鼠 PGK1 / PGKA 蛋白

HCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原 0.5mgHCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原)

EPHB3 Protein Human 重組人 EphB3 / HEK2 蛋白 (aa 585-998, His & GST 標(biāo)簽)

UCHL1重組大鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 Protein

PGK1 Protein Mouse 重組小鼠 PGK1 / PGKA 蛋白

SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein

大鼠尿道平滑肌細(xì)胞大鼠白介素7(IL-7)試劑盒 ，英文名： IL-7 ELISA Kit

Mouse ierleukin 17 (IL-17) ELISA Kit 小鼠白介素17(IL-17)試劑盒

ELISA 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIP-10/CXCL10ELISAKit大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10

通用型脯(proline)含量比色法定量試劑盒20次

ELISAKiAES大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子