詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
卵巢 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8243 |
細胞簡介:
大鼠卵泡基膜(卵泡膜細胞)分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成,垂體素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體素的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞,并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に亍R虼?,卵泡膜細胞在生殖?nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾?。ㄈ缍嗄衣殉簿C合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,參與構(gòu)成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調(diào)節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關(guān)報道,但是有關(guān)卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠卵泡基膜采用先機械分離后膠原酶消化結(jié)合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠卵泡基膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠卵泡基膜體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素27(IL-27)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素23(IL-23)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌酸激酶(CK)試劑盒 96T/48T
Human myelin protein 2 (P2) ELISA Kit 人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)試劑盒
HumanLinkerforactivationofTcell,LATELISAKit 人T細胞活化連接蛋白(LAT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Ku-aibody試劑盒人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物彌散吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量試劑盒(包括萃取)20次
HumanVaricellazostervirusIgM,VZVIgMELISAKit人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
20號染色體開放閱讀框24抗體
磷酸化基質(zhì)重塑相關(guān)蛋白PARVA抗體
JAM2重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 0.5mgAnnexin A 膜粘連蛋白 A抗原
ADIPOQ重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標簽) Protein
EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白
CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 (Fc 標簽)
白細胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)重組蛋白 Recombinant Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2 (LAIR2)
EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白
RETN重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標簽) Protein
REG1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 標簽)
MERTK重組人 MERTK / Mer (aa 578-872) 蛋白 Protein
大鼠卵泡基膜細胞大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 ,英文名: IL-8/CXCL8 ELISA Kit
Mouse ierleukin 13 (IL-13) ELISA Kit 小鼠白介素13(IL-13)試劑盒
ELISA 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞衍化營養(yǎng)因子(mouse GDNF) 進口分裝
CLIAKitfori-PTHELISAKit大鼠全段甲狀旁腺素
通用型非洲(Africanswinefevervirus;ACSF)試劑盒20次
ELISAKitLPL大鼠脂蛋白脂酶
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行