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          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞

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            經(jīng)銷商
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            上海市

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          更新時(shí)間:2024-11-05 09:31:02瀏覽次數(shù):668

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) YS-01X8234 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:鋅指蛋白598抗體 Ran結(jié)合蛋白11抗體 人卵巢上皮細(xì)胞 磷酸化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 大鼠胰腺上皮細(xì)胞 EYA3蛋白抗體 人心臟纖維原細(xì)胞 乙?;D(zhuǎn)移酶14抗體

          詳細(xì)介紹

          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞

          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號(hào)

          關(guān)節(jié)囊

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          成纖維細(xì)胞樣

          YS-01X8234

          細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維分離自關(guān)節(jié)囊組織;關(guān)節(jié)囊(articular capsule)是由結(jié)締組織構(gòu)成的膜囊,附著于關(guān)節(jié)的周圍,密封關(guān)節(jié)腔。關(guān)節(jié)囊的壁共有兩層:外層為纖維層;內(nèi)層為滑膜層。纖維層實(shí)際上是一個(gè)連結(jié)骨的骨膜向另一骨骨膜的移行。纖維層厚而堅(jiān)韌,由致密結(jié)締組織構(gòu)成,含有豐富的血管和神經(jīng)。其淺層纖維多呈縱行排列;深層纖維主要為環(huán)行纖維。纖維層的厚薄,各個(gè)關(guān)節(jié)不相同,即是在同一關(guān)節(jié)中,各部也不一致一般在運(yùn)動(dòng)范圍小的或是負(fù)重較大的關(guān)節(jié)中,都較厚而緊張,相反,于運(yùn)動(dòng)靈活的關(guān)節(jié),則較薄而松弛。有的關(guān)節(jié)囊的部分纖維囊缺如,僅一層滑膜層;有的部分明顯增厚,形成韌帶。滑膜層薄而柔潤(rùn),是由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,襯在纖維層內(nèi)面,周緣附著在關(guān)節(jié)軟骨的邊緣。它朝向關(guān)節(jié)腔的內(nèi)面光而發(fā)亮,此面上蓋有一層內(nèi)皮細(xì)胞?;は蜿P(guān)節(jié)腔分泌滑液,滑液是稍粘稠而透明的液體,可減少關(guān)節(jié)中相連骨的摩擦,是一種滑潤(rùn)劑?;け砻婵尚纬山q毛或皺襞突入關(guān)節(jié)腔內(nèi)。有時(shí)滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出,形成滑膜囊,常位于肌腱與骨面之間。有時(shí)滑膜層突出不明顯,僅呈深窩狀,稱為囊狀隱窩。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

          方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、bFGF、InsulinPenicillin、Streptomycin

          換液頻率:每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性:貼壁

          細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性:可傳3代左右

          消化液:0.25%

          培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

           ?、?消化培養(yǎng)法

            ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

            ④器官培養(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

          小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

          小鼠組胺(mouse HIS)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

          小鼠肝生素(mouse HGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

          小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T

          Human papilloma virus aibody IgG (HPV-IgG) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)試劑盒

          Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgM試劑盒人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          植物黑色素含量比色法定量試劑盒20

          Humanα-enolase,αENOLELISAKit人α烯醇化酶(αENOL)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          胞漿蛋白SH3GL3抗體

          磷酸化14-3-3E蛋白抗體

          CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

          神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)

          PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein

          EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白

          HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

          神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)

          EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白

          CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

          HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

          PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein

          大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞大鼠白細(xì)胞介素18(IL-18)試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit

          Mouse macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒

          MouseLebtospiraIgGELISAKit 小鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          CLIAKitforHumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKitNOD樣受體

          同位素真菌/酵母細(xì)胞蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒20

          ELISAKitsLR大鼠可溶性瘦素受體

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

            4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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