詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠外周血樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
組織來(lái)源:外周血
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
RPMI-1640、FBS、樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠外周血DC分離自外周血,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞,全稱(chēng)樹(shù)突狀細(xì)胞(DC),是近年來(lái)倍受們關(guān)注的專(zhuān)職抗原呈遞細(xì)胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類(lèi)與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,因其細(xì)胞膜向外伸出,形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹(shù)狀突起,故而命名為樹(shù)突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。
方法簡(jiǎn)介:
見(jiàn)說(shuō)明
質(zhì)量檢測(cè):
本公司生產(chǎn)的大鼠外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過(guò)程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞純度可達(dá)85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人粘蛋白1(MUC1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T ELISA 組裝/原裝
人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
人早老素2(PS-2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: IL1Ra ELISA Kit
Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)檢測(cè)試劑盒
rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 兔子白介素4(IL-4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-CG(MouseChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit小鼠絨毛膜β
細(xì)菌乙醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰島素受體α抗體
PITX3抗體
CD274重組人 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
精酶(ARG)重組蛋白 Recombinant Arginase (ARG)
FAM171B重組人 FAM171B / KIAA1946 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ITCH Protein Human 重組人 ITCH / AIP4 蛋白 (aa 526-903)
HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
精酶(ARG)重組蛋白 Recombinant Arginase (ARG)
ITCH Protein Human 重組人 ITCH / AIP4 蛋白 (aa 526-903)
CD274重組人 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
FAM171B重組人 FAM171B / KIAA1946 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠外周血樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒
Human anspoer associated with aigen processing (TAP) ELISA Kit 人抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)檢測(cè)試劑盒
Humahymusindependeaigen,TI-AgELISAKit 人非依賴(lài)性抗原(TI-Ag)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAAA(Humanai-Actinaibody)ELISAKit人抗肌動(dòng)蛋白抗體
胰腺脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Mouseneurofilameprotein,NFELISAKit小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作