詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X7624 |
細胞簡介:
大鼠多巴胺神經(jīng)元分離腦組織;多巴胺神經(jīng)元,即:胺能神經(jīng)元,主要指含多巴胺的神經(jīng)元,其細胞體主要分布在黑質(zhì)、腳間核和丘腦下部等處。在這些區(qū)域多巴胺含量很高。多巴胺在機體內(nèi)合成時以為原料。腦內(nèi)的多巴胺主要是由黑質(zhì)細胞來合成,這些多巴胺參與錐體外系統(tǒng)的活動,與軀體運動機能有密切關(guān)系。腦內(nèi)多巴胺代謝失常時,可引起震顫性麻痹(帕金森震顫)。多巴胺(Dopamine),是NA的前體物質(zhì),是下丘腦和腦垂體腺中的一種關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì),中樞神經(jīng)系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響,神經(jīng)末梢的GnRH和多巴胺間存在著軸突聯(lián)系并相互作用,以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中腦的神經(jīng)原物質(zhì)多巴胺(Dopamine),則直接影響人們的情緒。從理論上來看,增加這種物質(zhì),就能讓人興奮,但是它會令人上癮。多巴胺在前腦和基底神經(jīng)節(jié)(Basal Ganglia)出現(xiàn),基底神經(jīng)節(jié)負責處理恐懼的情緒,但由于多巴胺的緣故,取代了恐懼的感覺,因此有很多人的上癮行為,都是因多巴胺而起的。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠多巴胺神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠多巴胺神經(jīng)元經(jīng)TH免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠髓過氧化物酶 英文名稱: Mouse Myeloperoxidase 規(guī)格: 英文縮寫: MPO
小鼠巨噬細胞趨化蛋白-1 英文名稱: monocyte chemotactic protein 1 規(guī)格: 英文縮寫: MCP-1
小鼠巨噬細胞趨化蛋白-3 英文名稱: monocyte chemotactic protein 3 規(guī)格: 英文縮寫: MCP-3
小鼠M-能受體結(jié)合力 英文名稱: M—cholinoceptor binding capacity 規(guī)格: 英文縮寫: MCBC
小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
cit瓜規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂肪酸合成酶單克隆抗體
VAC14蛋白抗體
WFDC2重組狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(人源)
TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein
CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白
CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白
OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(人源)
CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白
WFDC2重組狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白
TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein
大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞小鼠神經(jīng)生長導向因子(Slit2) ELISA 試劑盒
Mueller tube inhibitory substance / ai Mueller tube hormone (MIS/AMH) ELISA Kit 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒
HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 人N-乙?;?span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
GoatBeta-Endorphin,β-EP試劑盒山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母黑色素含量比色法定量試劑盒20次
MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。