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          大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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          更新時(shí)間:2024-10-28 17:34:59瀏覽次數(shù):96

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) YS-01X6996 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
          大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體17抗體 真核翻譯起始因子3H抗體 NADH氧化還原酶輔酶7抗體 大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 小鼠真皮成纖維細(xì)胞 小鼠胚胎干細(xì)胞;SOX1-GFP MA-891 (小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)

          詳細(xì)介紹

          大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

          大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來(lái)源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號(hào)

          肺組織

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          內(nèi)皮細(xì)胞樣

          YS-01X6996

          細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠肺微血管內(nèi)皮分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細(xì)胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細(xì)胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障,該屏障對(duì)于肺氣體交換,調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動(dòng)具有重要意義。

          方法簡(jiǎn)介:

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測(cè):

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

          培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性 貼壁

          細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

          傳代特性 可傳2-3

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

          大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

            ② 消化培養(yǎng)法

           ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

            ④器官培養(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

          大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

          大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

          大鼠血小板生成素(TPO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

          小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T

          Human deoxyribonucleic protein aibody (DNP-Ab) ELISA Kit 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)試劑盒

          Humangasieceptor,GsaRELISAKit 人促胃液素受體(GsaR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          CLIAKitforACA-IgMELISAKit大鼠抗心0脂抗體IgM

          藥品乙酸比色法定量試劑盒20

          Mouseoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K99抗體

          白細(xì)胞蛋白酶3抗體

          IGFBP4重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 Protein

          Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mgMelan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)

          PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

          CBFB Protein Human 重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白

          KLK7 Protein Mouse 重組小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 蛋白

          Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mgMelan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)

          CBFB Protein Human 重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白

          IGFBP4重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 Protein

          KLK7 Protein Mouse 重組小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 蛋白

          PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

          大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA 試劑盒

          Prothrombin fragme F1+2 (F1+2) ELISA Kit 人原片段F1+2(F1+2)試劑盒

          HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG試劑盒人1,3-0酸甘油酸(1,3-DPG)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          真菌/酵母細(xì)胞線粒體粗提分離試劑盒10

          MouseAzidothymidine,AZTELISAKit小鼠(AZT)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

            4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。


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