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本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠肝枯否細(xì)胞
組織來(lái)源：肝臟組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、巨噬細(xì)胞
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 試劑盒因（12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠枯否分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接?？莘袷霞?xì)胞(Kupffer細(xì)胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細(xì)胞，它能吞噬和清除大部分從腸道來(lái)的抗原微粒，并能吞噬和清除肝血竇中的細(xì)菌、異物和衰老的紅細(xì)胞，并把血紅蛋白分解成。此外，肝巨噬細(xì)胞也有處理抗原，誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖，參與免疫調(diào)節(jié)的作用?？莘袷霞?xì)胞和一般巨噬細(xì)胞不同，枯否氏細(xì)胞不具有增加抗原免疫原性的能力，相反有消除或減弱抗原性的作用。枯否氏細(xì)胞能吞噬來(lái)自血液循環(huán)的抗原抗體復(fù)合物和其他有害物質(zhì)，以消除這些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的損害?？莘窦?xì)胞功能障礙可導(dǎo)致腸源性?xún)?nèi)毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝枯否采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝枯否經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
粒細(xì)胞活化肽 (NAP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
噬及細(xì)胞活化肽 -2(NAP-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
神經(jīng)激肽 A(Neurokinin A) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
中心粒細(xì)胞彈性蛋白酶 (Neuophil elastase) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
豬雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒
PorcineOrexinB,OX-BELISAKit 豬食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALP-B(HumanBone-specificAlkphaseB)ELISAKit人骨特異性堿性0酸酶B
血液0酸二酯酶5(PDE5)活性熒光定量試劑盒10次
Mouseα-galactoyl,GalELISAKit小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)試劑盒
組蛋白H3樣蛋白抗體
超氧化物歧化酶1（銅/鋅過(guò)氧化物歧化酶SOD）抗體
CEACAM1重組人 CEACAM1 / CD66a 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
硫酸皮膚素差向異構(gòu)酶(DSE)重組蛋白 Recombinant Dermatan Sulfate Epimerase (DSE)
TPK1重組人 TPK1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALDH7A1 Protein Human 重組人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
M1 Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
硫酸皮膚素差向異構(gòu)酶(DSE)重組蛋白 Recombinant Dermatan Sulfate Epimerase (DSE)
ALDH7A1 Protein Human 重組人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CEACAM1重組人 CEACAM1 / CD66a 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
M1 Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TPK1重組人 TPK1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠肝枯否細(xì)胞小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒
Rat alkaline phosphatase (ALP) ELISA Kit 大鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒
HumanFreeProteinS,FP-SELISAKit 人游離蛋白S(FP-S)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRab試劑盒人乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒
正常人體腸組織S9組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit小鼠抗粒/中心體抗體(ACA)試劑盒
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