Bradford 蛋白濃度測定試劑盒

產(chǎn)品貨號：16005

產(chǎn)品規(guī)格：500 次/1000 次

產(chǎn)品簡介：

  Bradford 蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一 Bradford 法研制而成，實現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速，穩(wěn)定和高靈敏度。檢測速度極快，10-20 個樣品只需不足 10 分鐘即可完成。靈敏度高，檢測濃度下限達到 25μg/ml，小檢測蛋白量達到 0.5μg，待測樣品體積為 1-20μl。在 50-1000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。  

  Bradford 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度 可高達 1M，二 硫蘇糖醇的濃度可高達 5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保 SDS 低于 0.01%，Triton X-100 低于 0.05%， Tween 20,60,80 低于 0.015%。含去垢劑的樣品*使用 BCA 蛋白濃度測定試劑盒。

包裝清單：

操作步驟：

1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

  *融化蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取 10μl 稀釋至 100μl，使終濃度為 0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用 什么溶液稀釋。但是為了簡便起見，也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 蛋白濃度測定

a. 將標(biāo)準(zhǔn)品按 0、1、2、4、8、12、16、20μl 加到 96 孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補足到 20μl， 相 當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

b. 加適當(dāng)體積樣品到 96 孔板的樣品孔中。如果樣品不足 20μl，需加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補足到 20μl。請注意記錄 樣品體積。

c. 各孔加入 200μl Bradford 溶液，室溫放置 3-5 分鐘。

d. 用酶標(biāo)儀測定 A595，或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度。

e. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和使用的樣品體積計算出樣品中的蛋白濃度。

注意事項：

1. Bradford 溶液使用前請顛倒 3-5 次，混勻。

2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)請在全部溶解后先混勻，再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標(biāo)準(zhǔn)。

3. 將 Bradford 溶液恢復(fù)到室溫再使用，有利于提高檢測的靈敏度。

4. 需可檢測 560-610nm 之間波長的酶標(biāo)儀一臺，*檢測波長為 595nm。并需 96 孔板。

5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存條件：

Bradford 溶液 4℃保存，蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存，本試劑盒自訂購之日起九個月內(nèi)有效。